缺氧誘導(dǎo)因子1α在缺氧誘導(dǎo)喉鱗癌細(xì)胞化療耐藥中的調(diào)控作用及分子機(jī)制.pdf

1、本文從以下三個部分來展開論述：
　　第一章
　　 目的：探討喉鱗癌組織中缺氧誘導(dǎo)因子lα(hypoxia-inducible factor lα，HIF-1α)與P糖蛋白、Survivin表達(dá)間的相關(guān)性；三者與臨床病理特征、預(yù)后的關(guān)系。
　　 方法：免疫組化法測HIF-1α、P糖蛋白、Survivin在86例喉鱗癌，32例正常喉粘膜上皮中的表達(dá)。
　　 結(jié)果：喉鱗癌組織中HIF-1α、P糖蛋白、Survi

2、vin陽性表達(dá)率均高于正常對照組，與腫瘤的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、術(shù)后生存率相關(guān)。HIF-1α與P糖蛋白、Survivin表達(dá)間均呈正相關(guān)。生存分析示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Survivin陽性表達(dá)率可作為喉鱗癌的獨(dú)立預(yù)后因素。
　　 結(jié)論：喉鱗痛組織中HIF-1α可能對P糖蛋白、Survivin表達(dá)存在正向調(diào)控性。三者均可作為評估喉鱗癌病程進(jìn)展及預(yù)后的生物學(xué)指標(biāo)。
　　 第二章
　　 目的：探討缺氧微環(huán)境對喉鱗癌細(xì)胞化療耐藥

3、性的影響及其調(diào)控機(jī)制。
　　 方法：喉鱗癌細(xì)胞于常氧或缺氧下培養(yǎng)，MTT法測細(xì)胞藥物敏感性：Annexin v/PI法測紫杉醇所誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡率；阿霉素蓄積與滯留試驗測細(xì)胞的藥物蓄積率、潴留率；實時熒光定量PCR(Realtime Quantative RT-PCR，QRT-PCR)、Western blot測MDR1、Survivin基因的mRNA、蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：與常氧組相比，缺氧喉鱗癌細(xì)胞的藥物敏感性、細(xì)胞

4、凋亡率、藥物蓄積率及潴留率均顯著降低；細(xì)胞中MDRI、Survivin基因的mRNA、蛋白表達(dá)水平隨缺氧時間的延長而升高，并于缺氧24小時達(dá)到高峰。
　　 結(jié)論：缺氧微環(huán)境可能通過上調(diào)MDR1、Survivin基因表達(dá)而增強(qiáng)喉鱗癌細(xì)胞的藥物外排及凋亡抑制能力，從而上調(diào)細(xì)胞的化療耐藥性。
　　 第三章
　　 目的：探討HIF-1α在缺氧誘導(dǎo)喉鱗癌細(xì)胞化療耐藥中的調(diào)控作用及機(jī)制。
　　 方法：QRT-PCR、

5、Western blot測常氧或缺氧下喉鱗癌細(xì)胞中HIF-1αmRNA、蛋白表達(dá)。小干擾RNA抑制缺氧下喉鱗癌細(xì)胞中HIF-1α基因表達(dá)后，QRT-PCR及Westernblot測HIF-1α、MDR1、Survivin基因的表達(dá)；聯(lián)合MTT法、Annexin V/PI法、阿霉素蓄積與潴留試驗測細(xì)胞化療耐藥性的變化。
　　 結(jié)果：HIF-1αmRNA表達(dá)不隨細(xì)胞缺氧而改變，而HIF-1α蛋白表達(dá)隨缺氧時間延長而上調(diào)，并于缺氧24