HA納米載體轉(zhuǎn)hGM-CSF HepG2疫苗聯(lián)合低劑量順鉑抗肝癌荷瘤鼠的實驗觀察.pdf

1、目的:聯(lián)合應(yīng)用HA納米轉(zhuǎn)GM-CSF HepG2疫苗與順鉑治療Hu-PBL-SCID荷瘤小鼠模型，應(yīng)用肝癌動物模型來研究肝癌疫苗免疫治療荷瘤小鼠的效果，同時比較肝癌疫苗聯(lián)合不同劑量順鉑化療對肝癌的治療效果，以期探討肝癌治療的新方法以及最佳方案，為尋找合理和規(guī)范的化療與腫瘤疫苗聯(lián)合應(yīng)用方案提供依據(jù)，使免疫化療方案為人類腫瘤的治療提供希望和戰(zhàn)勝癌癥的信心。
　　方法:制備HA納米轉(zhuǎn)GM-CSF HepG2疫苗以及建造Hu-PBL-SC

2、ID荷瘤小鼠模型，并測量裸鼠腫瘤尺寸，然后將符合成瘤標(biāo)準(zhǔn)的荷瘤小鼠隨機(jī)分為采用不同方案進(jìn)行治療的以下四組，每組5只:(1)對照組:僅以生理鹽水0.2 ml/只注射小鼠腹腔，每天一次，連續(xù)14天;(2)疫苗組:予以轉(zhuǎn)hGM-CSF HepG2疫苗(1×107/ml)0.2 ml/只注射右側(cè)背部皮下，7天后再重復(fù)注射一次;(3)小劑量順鉑聯(lián)合疫苗組（簡稱LDM聯(lián)合組）:2mg/(kg.d)順鉑注射小鼠腹腔，每天一次，連續(xù)3天后給予轉(zhuǎn)hGM-

3、CSF HepG2疫苗(1×107/ ml)0.2 ml/只注射右側(cè)背部皮下，7天后再重復(fù)上述步驟;(4)最大耐受劑量順鉑聯(lián)合疫苗組（簡稱MTD聯(lián)合組）:順鉑9mg/(kg.d)一次性注入小鼠腹腔，3天后予轉(zhuǎn)hGM-CSF HepG2疫苗(1×107/ml)0.2 ml/只注射右側(cè)背部皮下，7天后再重復(fù)上述步驟。通過以下指標(biāo)對各組HepG2荷瘤小鼠治療后的療效進(jìn)行檢測:(1)采用MTT法（噻唑藍(lán)比色法）檢測各組小鼠脾細(xì)胞CTL活性;(2

4、)采用ELISA方法檢測各組小鼠血清TGF-α、INF-γ水平以及脾指數(shù)。(3)觀察小鼠體質(zhì)量及毒副反應(yīng);(4)測小鼠瘤體積、瘤質(zhì)量及抑瘤率;
　　結(jié)果:(1)轉(zhuǎn)基因腫瘤疫苗與Hu-PBL-SCID荷瘤小鼠模型制備成功。(2)各組小鼠的CTL殺傷活性以LDM聯(lián)合組為最強(qiáng)，差異具有統(tǒng)計意義(P＜0.05);疫苗組以及MTD聯(lián)合組的CTL殺傷活性比對照組強(qiáng)(P＞0.05)。(3)各組小鼠血清的TNF-α、IFN-γ水平及脾指數(shù)以LDM