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1、中藥作用機(jī)理研究是中藥現(xiàn)代化的重點(diǎn).但中藥復(fù)雜的化學(xué)成分和多靶點(diǎn)、多途徑的作用特點(diǎn)給作用機(jī)理的研究帶來(lái)很大困難.該研究通過(guò)對(duì)細(xì)胞學(xué)和動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的考察,結(jié)合基因芯片技術(shù)研究四物湯化學(xué)成分配伍對(duì)細(xì)胞因子基因表達(dá)譜的影響,闡明了四物湯化學(xué)成分與造血相關(guān)細(xì)胞因子基因表達(dá)變化的關(guān)系,并為中藥作用機(jī)理研究、有效成分群的確認(rèn)提供可行的技術(shù)路線和技術(shù)平臺(tái).主要結(jié)果摘要如下:1.四物湯化學(xué)成分配伍1、配伍2對(duì)人骨髓基質(zhì)細(xì)胞系HFCL細(xì)胞幸均有促增殖作
2、用,應(yīng)用新制備的人造血相關(guān)細(xì)胞因子寡核苷酸表達(dá)譜芯片研究其機(jī)理,發(fā)現(xiàn)配伍1作用于HFCL細(xì)胞12h后IL-2R、NF-κb、TPO的基因表達(dá)上調(diào),這三者的作用可能與四物湯促進(jìn)骨髓造血干祖細(xì)胞的增殖,抑制骨髓造血干祖細(xì)胞的凋亡作用相關(guān).配伍2作用于HFCL細(xì)胞12h后NF-κb、G-CSF-R、IL-13、VEGF、IL-5、GM-CSFR-α的基因表達(dá)上調(diào).結(jié)合四物湯的作用機(jī)理發(fā)現(xiàn),發(fā)現(xiàn)四物湯作用機(jī)制不但與其所含的化學(xué)成分而且和化學(xué)成分
3、比例也存在一定的相關(guān)性.還發(fā)現(xiàn)葡萄糖和蔗糖、芍藥苷和川芎嗪對(duì)促HFCL細(xì)胞的增殖分別有交互作用 2.四物湯化學(xué)成分配伍1、配伍2可顯著升高血虛小鼠外周血中的白細(xì)胞,促進(jìn)粒系(CFU GM)、紅系(BFUE,CFUE)、混合系(CFU mix)造血祖細(xì)胞集落的增殖.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明配伍1是四物湯作用的物質(zhì)基礎(chǔ),但可能由于四物湯仍含有其它有效成分,所以配伍1對(duì)CFUE、CFU mix的促增殖作用顯著弱于四物湯.小鼠骨髓表達(dá)譜芯片結(jié)果與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)
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