電針刺激百會(huì)穴治療鋰—匹羅卡品誘導(dǎo)性大鼠癲癎發(fā)作的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、癲癎是一種反復(fù)發(fā)作的神經(jīng)元異常放電引起的的暫時(shí)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能失常性疾病，是神經(jīng)病學(xué)專業(yè)常見疾病之一，中醫(yī)稱癲癎為癎癥，人群患病率約為0.5％～2％。 祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)積累了豐富的癲癎治療理論和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，針刺穴位治療癲癎是其中的一個(gè)重要部分。目前，傳統(tǒng)針刺穴位治療癲癎的療效已為眾多的學(xué)者所接受，尤其是其對(duì)控制癲癎發(fā)作的效果。研究資料表明，針刺的調(diào)整作用是最根本的作用，它貫穿于針刺的所有生物學(xué)效應(yīng)之中。針刺的調(diào)整作用通過神經(jīng)系統(tǒng)、神

2、經(jīng)—體液系統(tǒng)、神經(jīng)—內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)三大平衡系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)。同時(shí)，近年來有關(guān)成年腦組織神經(jīng)發(fā)生的研究發(fā)現(xiàn)，缺血、缺氧、外傷、癲癎等許多原因所致的腦損傷均可誘導(dǎo)成年海馬齒狀回神經(jīng)元再生的增加，成年哺乳動(dòng)物腦內(nèi)神經(jīng)元再生相關(guān)機(jī)制的研究已成為神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的一個(gè)最激動(dòng)人心的課題。國(guó)內(nèi)、外相關(guān)研究結(jié)果表明癲癎后的海馬齒狀回的神經(jīng)發(fā)生即神經(jīng)可塑性的改變與癲癎的發(fā)生和發(fā)作密切相關(guān)，而祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的理論和實(shí)踐，也顯示穴位刺激具有明顯的抑制癲癎發(fā)生與發(fā)作的作

3、用。因此，在目前我們對(duì)穴位刺激治療癲癎基礎(chǔ)研究領(lǐng)域尚缺乏深入實(shí)驗(yàn)研究的前提下，探討針刺治療癲癎的機(jī)制也成為一個(gè)迫切需要解決的問題，特別是針刺穴位刺激是否會(huì)對(duì)海馬齒狀回神經(jīng)發(fā)生產(chǎn)生影響更是一個(gè)值得我們關(guān)注的內(nèi)容。 為此，本實(shí)驗(yàn)采用鋰——匹羅卡品大鼠癲癎模型進(jìn)行了以下幾方面的研究： (1)觀察電針穴位刺激的抗癲癎作用； (2)觀察電針穴位刺激對(duì)癲癎大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響； (3)觀察電針穴位刺激對(duì)癲癎大鼠海馬齒狀

4、回神經(jīng)發(fā)生的影響； (4)探討電針穴位刺激抗癲癎作用的相關(guān)機(jī)制。 主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：(1)電針刺激百會(huì)穴可明顯減少致癎大鼠慢性期自發(fā)反復(fù)發(fā)作(SRSs)的發(fā)作次數(shù)(P＜0.05)，并對(duì)致癎大鼠多個(gè)腦區(qū)的癎樣電活動(dòng)有明顯的抑制作用(P＜0.05)，尤以杏仁核為著。 (2)與對(duì)照組相比，電針刺激百會(huì)穴可明顯縮短致癎大鼠在MORRIS水迷宮尋找平臺(tái)的時(shí)間(P＜0.05)，避暗實(shí)驗(yàn)潛伏期顯著增加，電針刺激百會(huì)穴和大椎穴可

5、明顯減少致癎大鼠的癎樣電活動(dòng)(P＜0.05)，刺激百會(huì)穴的抑癎效果優(yōu)于大椎穴。阻斷大椎穴相關(guān)雙側(cè)脊神經(jīng)后，針刺大椎穴的抑癎效果明顯不如單側(cè)阻斷和假手術(shù)對(duì)照的致癎大鼠。 (3)①鋰—匹羅卡品誘導(dǎo)致癎大鼠癲癎發(fā)作后齒狀回神經(jīng)前體細(xì)胞增殖速度在1w時(shí)間點(diǎn)達(dá)到峰值(P＜0.01)，2w時(shí)增殖水平明顯下降，3w時(shí)增殖水平又開始逐漸升高，其后雖有下降，但與3w時(shí)增殖水平相比無顯著性差異(P＜0.05)。②新生細(xì)胞大多遷移入顆粒細(xì)胞層，并分化

6、為神經(jīng)元。③新生細(xì)胞透射電鏡下顯示，BrdU陽性產(chǎn)物為黑色絮狀電子高密度物質(zhì)，分布于細(xì)胞核與線粒體內(nèi)，尤其以細(xì)胞核內(nèi)為著，細(xì)胞核內(nèi)常染色質(zhì)多，可見較豐富的線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。 (4)電針穴位刺激后，可使癲癎發(fā)作后新生細(xì)胞存活數(shù)目增多。BrdU免疫陽性細(xì)胞數(shù)目較相應(yīng)對(duì)照組明顯增多(P＜0.05)。 (5)鋰—匹羅卡品誘導(dǎo)致癎大鼠多個(gè)腦區(qū)均可見較高密度的Fos陽性神經(jīng)元。額、顳葉皮質(zhì)密度較高，杏仁核、海馬的Fos陽性神經(jīng)元密

7、度次之。電針穴位刺激后致癎大鼠額、顳葉皮質(zhì)和杏仁核Fos表達(dá)水平降低，海馬區(qū)Fos表達(dá)抑制更為明顯。 (6)電針穴位刺激后，海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)GFAP陽性細(xì)胞雖然較正常對(duì)照組的數(shù)量明顯增多，深染，細(xì)胞形態(tài)亦發(fā)生了變化，胞體肥大，突起變得粗長(zhǎng)，但不如非刺激癲癎大鼠海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)GFAP陽性細(xì)胞的變化明顯。且GFAP陽性細(xì)胞的變化與Fos表達(dá)陽性神經(jīng)元的變化一致。 上述結(jié)果表明：(1)電針刺激百會(huì)穴對(duì)鋰—匹羅卡品誘導(dǎo)致癎大鼠的慢性發(fā)作具

8、有明顯的抑癎作用，杏仁核可能是抑癎作用的關(guān)鍵核團(tuán)。 (2)電針刺激百會(huì)穴對(duì)鋰—匹羅卡品誘導(dǎo)致癎大鼠的認(rèn)知功能具有明顯的改善作用，其機(jī)制與電針穴位刺激可部分修復(fù)由癲癎發(fā)作所致的海馬病理性損害有關(guān)。 (3)穴位電針刺激能有效抑制鋰—匹羅卡品誘導(dǎo)致癎大鼠的癎樣電活動(dòng)，其抑癎機(jī)制依賴于抑癎信號(hào)的穴位—神經(jīng)傳入解剖途徑。 (4)穴位電針刺激后Fos陽性表達(dá)改變的腦區(qū)可能是穴位刺激發(fā)揮抑癎作用的關(guān)鍵腦區(qū)，其神經(jīng)元活性的改變或

9、遞質(zhì)調(diào)節(jié)可能直接或間接影響大腦皮質(zhì)的功能。 (5)電針穴位刺激的抑癎作用機(jī)制不僅與癲癎相關(guān)腦區(qū)內(nèi)神經(jīng)元興奮有關(guān)，而且與此部位星形膠質(zhì)細(xì)胞的活性變化也有關(guān)。其抑癎的生理效應(yīng)依賴于星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元之間的信息傳遞。 (6)鋰—匹羅卡品誘導(dǎo)致癎大鼠齒狀回神經(jīng)發(fā)生有其獨(dú)特的時(shí)間規(guī)律，該動(dòng)物模型致癎后慢性期的自發(fā)性反復(fù)發(fā)作可能與這一病理改變有關(guān)。 (7)電針刺激百會(huì)穴可使癲癎發(fā)作后海馬齒狀回新生細(xì)胞存活數(shù)目增多，即電針刺

10、激百會(huì)穴在一定的程度上參與了癲癎后海馬的神經(jīng)可塑性變化。 本研究創(chuàng)新之處：(1)采用中西醫(yī)、基礎(chǔ)與臨床相結(jié)合，利用現(xiàn)代科技手段，全面系統(tǒng)地研究針刺治療癲癎的機(jī)制。 (2)提出中線穴位(任脈、督脈)及頭面部穴位在治療癲癎中具有的特殊性，并對(duì)其療效機(jī)制的解剖學(xué)特點(diǎn)(兩側(cè)神經(jīng)重疊支配)進(jìn)行了探討。 (3)針刺治療癲癎療程長(zhǎng)、顯效慢嘗試從神經(jīng)可塑性變化的角度闡明針刺穴位治療癲癎的機(jī)制 總之，本研究在整理針刺治療癲