鎮(zhèn)江市地方醫(yī)院環(huán)境源病原菌的鑒定及其特性分析.pdf

1、醫(yī)院環(huán)境的污染水平、抗菌劑的耐藥性都是如今醫(yī)療衛(wèi)生領(lǐng)域備受關(guān)注的重要問題。醫(yī)院的環(huán)境微生物是醫(yī)院感染發(fā)生和暴發(fā)的重要來源之一，環(huán)境微生物對抗生素和消毒劑等抗菌劑的耐受性大大增加了控制醫(yī)院環(huán)境污染的難度。微生物的種類及其對抗菌劑的敏感性會(huì)因不同的醫(yī)院環(huán)境、醫(yī)療設(shè)施以及不同的地理區(qū)域而不同，因此，地方醫(yī)院的環(huán)境微生物種類、特性與地方的衛(wèi)生安全和感染的預(yù)防控制息息相關(guān)。本研究從鎮(zhèn)江市地方醫(yī)院消毒后的環(huán)境中隨機(jī)采樣，旨在了解地方醫(yī)院環(huán)境的細(xì)菌種

2、類、病原性特征以及對抗菌劑的敏感性，為醫(yī)院進(jìn)行有效的消毒滅菌和合理地選擇抗生素治療感染提供重要參考，同時(shí)為探索醫(yī)院環(huán)境未知細(xì)菌的特性提供一定研究信息。主要的研究內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　1、鎮(zhèn)江地方醫(yī)院消毒后環(huán)境中的細(xì)菌分離、純化及鑒定
　　從經(jīng)消毒滅菌后的醫(yī)院環(huán)境中采樣并分離純化獲得了26株細(xì)菌，通過設(shè)計(jì)特定引物PCR克隆各個(gè)細(xì)菌的16S rRNA全長基因，提交到NCBI數(shù)據(jù)庫進(jìn)行序列比對和菌株鑒定，結(jié)果顯示分離到的細(xì)菌有15

3、株芽孢桿菌(57％)、3株葡萄球菌(12％)、6株微球菌(23％)、1株埃希氏桿菌(4％)和1株微桿菌(4％)。利用生物信息學(xué)軟件Mega5.0構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(Neighbor-Joining Tree)，對這些細(xì)菌進(jìn)行初步分類。
　　2、細(xì)菌對抗生素的敏感性檢測
　　選擇5種常用抗生素采用微量營養(yǎng)肉湯稀釋法(Broth MicroDilution Method)對試驗(yàn)細(xì)菌進(jìn)行了體外抗菌藥物敏感性試驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，25株細(xì)菌都

4、對一種或一種以上的抗生素具有耐藥性，其中有些菌株對三種、甚至四種抗生素都具有耐藥性，共有6株細(xì)菌具有多藥耐藥性。實(shí)驗(yàn)中沒有發(fā)現(xiàn)對氨芐青霉素有抗性的菌株，提示氨芐青霉素在治療耐藥細(xì)菌感染中的有效作用。
　　3、細(xì)菌對消毒劑的耐受性分析
　　對兩種常用消毒劑進(jìn)行最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)試驗(yàn)以檢測分離細(xì)菌對消毒劑的敏感性，并與消毒劑產(chǎn)品的使用說明進(jìn)行比較。采用營養(yǎng)肉湯稀釋法分別測得各個(gè)菌株對84消毒液和碘伏的

5、MICs和MBCs。MIC的結(jié)果顯示，與標(biāo)準(zhǔn)菌株相比，8株細(xì)菌對含氯消毒劑具有耐受性，12株細(xì)菌對含碘消毒劑的MIC值高出標(biāo)準(zhǔn)菌株的10％。結(jié)合MBC的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，經(jīng)過消毒的醫(yī)院環(huán)境仍存在的細(xì)菌有些是對消毒劑具有抗性，而有些則沒有抗性。將消毒劑產(chǎn)品的使用說明與實(shí)驗(yàn)測得的MIC和MBC值進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，消毒劑產(chǎn)品的推薦使用濃度和實(shí)際需要濃度存在一定的差異。
　　4、細(xì)菌毒性的評(píng)估
　　利用家蠶感染模型評(píng)估了25株醫(yī)院環(huán)境細(xì)

6、菌的毒性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，15株細(xì)菌的過夜培養(yǎng)物注射家蠶血淋巴能夠在5天內(nèi)殺死全部的家蠶幼蟲，其它的菌株也能夠殺死一定數(shù)目的幼蟲。各個(gè)菌株之間的這種致死能力相差較大，其中，14號(hào)芽孢桿菌能夠在12h內(nèi)殺死全部的幼蟲;24號(hào)微球菌能夠在1d內(nèi)殺死全部幼蟲。細(xì)菌定量感染家蠶實(shí)驗(yàn)測得14號(hào)芽孢桿菌對家蠶的半致死劑量為4×104cfu/larva，24號(hào)微球菌對家蠶的半致死劑量為1×104cfu/larva。而這兩株細(xì)菌經(jīng)口感染家蠶不能使家蠶致死，提