苦瓜核心種質(zhì)的構(gòu)建與評價.pdf

1、苦瓜為葫蘆科苦瓜屬植物，在我國有幾百年的栽培歷史，形成了豐富的遺傳多樣性。這些性狀為選育優(yōu)良品種提供了豐富的原材料，同時也給種質(zhì)資源的保存利用與種質(zhì)評價帶來了很多問題，為此，迫切需要開展苦瓜核心種質(zhì)的構(gòu)建與評價的研究工作，為優(yōu)良種質(zhì)資源的優(yōu)良性狀的利用和保存提供理論基礎(chǔ)。本研究分別利用形態(tài)學(xué)標(biāo)記以及分子標(biāo)記，結(jié)合遺傳多樣性分析，在244份苦瓜材料中篩選出71份材料，形成了苦瓜的核心種質(zhì)。其主要結(jié)論如下:
　　1.利用244份苦瓜材

2、料，以收集到的22個苦瓜形態(tài)學(xué)性狀數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，比較了以果實形狀為分類標(biāo)準(zhǔn)下的24種取樣方案，通過比較各個方案的4個重要評價參數(shù)，篩選出最優(yōu)方案為:在20％的總體取樣規(guī)模下采用逐步聚類分析法按照對數(shù)比例在組內(nèi)取樣，形成預(yù)選核心種質(zhì)，然后對比原種質(zhì)的各個性狀，對丟失的性狀加以補充，最終確定了含有50份材料的基于形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)的初選苦瓜核心種質(zhì)。
　　2.利用引物N6和苦瓜材料MC9采用L16(45)正交設(shè)計實驗對苦瓜SSR-PCR反應(yīng)體系

3、進行優(yōu)化。并通過正交設(shè)計直觀分析法對Mg2+濃度、dNTPs濃度、Taq聚合酶量進行了單因素確定。實驗結(jié)果表明，苦瓜SSR-PCR反應(yīng)體系中包含1μL10×PCR buffer，Mg2+濃度為1.75mmol/L，dNTPs濃度為0.25mmol/L，DNA100 ng，引物0.20 mmol/L，Taq DNA聚合酶1U，ddH2O補足至10μL。
　　3.利用18份表型性狀差異較大的苦瓜種質(zhì)的基因組DNA，在120對瓜類通用引

4、物和苦瓜特異性引物中篩選出13對用于群體多樣性分析，13對具有多態(tài)性的SSR引物擴增出89條帶，其中有73條條帶具有多態(tài)性，多態(tài)性條帶百分百為82.02％。
　　4.利用13對SSR引物對群體進行擴增，利用擴增結(jié)果建立“1”、“0”數(shù)據(jù)庫矩陣，利用此數(shù)據(jù)庫對苦瓜種質(zhì)進行聚類壓縮，結(jié)果表明在30％的壓縮比例下可以最大程度的保留原始群體的遺傳多樣性，獲得了含有73份材料的基于分子數(shù)據(jù)的初選苦瓜核心種質(zhì)。
　　5.整合基于分子和形