Nicastrin與THAP7的相互作用.pdf

1、阿爾茨海默氏病(Alzheimer's disease，AD)是一種漸進性神經退行性疾病，在AD患者腦內有兩個明顯的組織病理學特征：即細胞內神經原纖維纏結(Neurofibrillary Tangle，NFT)和細胞外的淀粉樣斑(Senile Plaque，SP)。SPs中含有大量的β-淀粉樣蛋白(beta-Amyloid protein，Aβ)。Aβ是淀粉樣前體蛋白(APP)經過β-和γ-分泌酶連續(xù)切割產生的，而Nicastrin(N

2、CT)是γ-分泌酶復合體的重要組成成分之一。最近的研究表明它在γ-分泌酶的組裝和成熟中扮演重要的角色，它調節(jié)γ-分泌酶復合體其他組分的穩(wěn)定、轉運等過程，同時它作為γ-分泌酶底物結合位點，賦予了γ-分泌酶廣泛的底物特異性。 為了進一步認識和了解NCT的生物學功能，以及它在阿爾茨海默癥發(fā)病過程中的作用，我們實驗室以NCT蛋白胞內端的686-709氨基酸為誘餌蛋白，通過酵母雙雜交方法在人胎腦cDNA文庫進行篩選，鑒定出一個在酵母中能夠

3、與NCT相互作用的蛋白，THAP7，其具有能夠與染色質和組蛋白相結合，抑制基因轉錄的作用。 在本課題中我們通過GST pull-down試驗和免疫共沉淀實驗證實NCT和THAP7在體外和哺乳動物細胞內都能發(fā)生相互作用。在293swedish細胞中過度表達THAP7能夠使NCT的mRNA水平降低，但卻引起NCT和γ-分泌酶其它組分的蛋白水平增加。而過度表達THAP7也可以使Aβ和sAPPα分泌都增加，同時使APP CTFs水平增加