皮質類固醇激素性青光眼大鼠眼內AQP1和AQP4表達的實驗研究.pdf

1、皮質類固醇激素性青光眼(glucocorticoidinducedglaucoma，GIG)是由于眼局部或全身使用皮質類固醇激素(glucocorticoid，GC)而誘發(fā)的一種開角型青光眼，文獻報道GC可導致90％以上原發(fā)開角型青光眼患者眼壓升高。小梁網的病理改變導致的房水外流阻力增加誘發(fā)眼壓升高。盡管存在諸多學說，如：精胺多糖(agmatinepolyglucose，GAGs)學說，小梁細胞吞噬學說，遺傳學說等，但長期應用皮質類固醇

2、激素誘發(fā)青光眼的發(fā)病機制至今尚不清楚。 目前關于GIG的研究更多的集中在小梁網的結構、功能，小梁網細胞特性、膜受體，如皮質類固醇激素受體和水通道蛋白的研究，小梁網細胞膜膜片鉗、單層細胞電阻測量儀體外測量跨小梁細胞電阻等生理功能性研究。此外，細胞外基質及基因調控等方面也是研究的熱點。 近年來隨著水通道蛋白概念的提出和眼內不同組織特異性水通道蛋白(aquaporin，AQPs)的檢出，有學者認為，小梁細胞AQPl的表達可能為

3、皮質類固醇激素引起眼壓升高機制的研究帶來新的突破，也有學者推測，眼局部或全身使用皮質類固醇激素可能使小梁細胞出現AQPl的異常表達和結構改變，致使房水轉導功能下降，眼壓升高。 目前皮質類固醇激素在臨床應用廣泛，為進一步研究GIG的可能機制，本實驗通過免疫組化及RT-PCR半定量方法，觀察比較了正常和皮質類固醇激素性青光眼大鼠眼內水通道蛋白AQPl和AQP4的表達變化，旨在探討水通道蛋白AQPl和AQP4與皮質類固醇激素性青光眼發(fā)

4、病機制的關系，為以后進一步的深入研究提供實驗數據和參考。 實驗方法 健康成年Wistar大鼠30只，隨機分為A、B兩組，A組10只不做處理；B組20只右眼隔日定時球結膜下注射地塞米松磷酸鈉(1ml：5mg)0．05ml，誘發(fā)皮質類固醇激素性高眼壓，同時左眼注射等量無菌生理鹽水。Tono-PenXL眼壓計分別于每次用藥前測量記錄眼壓值，并于用藥后4wk摘除A、B兩組大鼠眼球，固定脫水，石蠟包埋，切片，免疫組化檢測眼內通道A

5、QPl和AQP4的表達情況；同時提取房角組織總RNA，行逆轉錄聚合酶鏈式反應(RT—PCR)半定量檢測房角組織中AQPl和AQP4的mRNA水平。 結果 皮質類固醇激素性青光眼大鼠模型：A組平均眼壓始終維持在14～15mmHg：B組右眼用藥后第10~12天眼壓開始逐漸升高，用藥4wk后右眼眼壓為(30．07±1．83)mmHg，升高(15．2±2．40)mmHg，與A組比較有明顯差異(尸<0．01)，左眼眼壓為(14．6

6、7±1．45)mmHg，較A組無明顯變化(尸>0．05)。免疫組化結果顯示：AQPl和AQP4均表達于各組大鼠睫狀體非色素上皮細胞，而房角組織未見AQP4的表達；B組右眼4wk后小梁網、Schlemm管內皮細胞及細胞外基質中AQPl表達量減少，而睫狀體非色素上皮細胞上AQPl和AQP4表達量未見變化；B組左眼4wk后上述各組織細胞上AQPl和AQP4的表達同A組，未見變化；RT—PCR結果顯示：A組大鼠房角組織AQPl的mRNA(灰度比