胰腺癌高轉(zhuǎn)移、易伴發(fā)糖尿病相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、近幾年，全球胰腺病的發(fā)病率和致死率漸增，在歐美，胰腺癌已經(jīng)是排名第四、五位的高致死率的惡性腫瘤。此課題主要針對(duì)其高轉(zhuǎn)移及易伴發(fā)糖尿病的特點(diǎn)進(jìn)行相關(guān)機(jī)制的研究。 第一部分：胰腺癌高轉(zhuǎn)移相關(guān)因子Sixl的表達(dá)研究 目的：從前期雙向電泳結(jié)果中的篩選出的候選腫瘤標(biāo)記物中進(jìn)一步篩選出與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白。找到其上游調(diào)控分子，并進(jìn)行進(jìn)一步研究，分析其表達(dá)與胰腺癌的關(guān)系及其臨床生物學(xué)意義。 方法：采用免疫組織化學(xué)的方法對(duì)候選腫

2、瘤標(biāo)記物進(jìn)行篩選，并用組織芯片及免疫印跡技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證。進(jìn)而采用免疫印跡及免疫組織化學(xué)技術(shù)，檢測(cè)其上游調(diào)控蛋白在4株胰腺癌細(xì)胞系及3T3細(xì)胞系的表達(dá)和其在胰腺癌、良性腺瘤、胰腺炎及癌旁組織中的表達(dá)。 結(jié)果：免疫組化結(jié)果顯示，與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的Ezrin蛋白在胰腺癌細(xì)胞及組織中表達(dá)顯著上調(diào)（P<0.05）。免疫印跡結(jié)果顯示，Ezrin的調(diào)控蛋白Sixl在Bxpc-3和CFPAC-1細(xì)胞株中的表達(dá)明顯增強(qiáng)；并且在胰腺癌組織和良性腺瘤組織

3、的表達(dá)也顯著高于癌旁組織。免疫組化結(jié)果顯示，34例（85.0％）胰腺癌組織、3例（75.0％）良性腺瘤組織、6例（60.0％）胰腺炎和癌旁組織中Sixl表達(dá)陽(yáng)性；其陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤大小和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)（P<0.05）。 結(jié)論：Ezrin與胰腺癌腫瘤轉(zhuǎn)移高度相關(guān)。上游調(diào)控蛋白Sixl表達(dá)是胰腺癌發(fā)生的早期事件，可能導(dǎo)致腫瘤向惡性發(fā)展；其表達(dá)水平與腫瘤大小及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。 第二部分：胰腺癌易伴發(fā)糖尿病相關(guān)機(jī)制的蛋白質(zhì)組學(xué)研究

4、 目的：發(fā)現(xiàn)可能的胰腺癌-糖尿病相關(guān)因子，并對(duì)發(fā)現(xiàn)的蛋白進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證與初步的分子生物學(xué)研究。 方法：采用人胰腺腫瘤細(xì)胞PANC-1的條件培養(yǎng)基（CM）刺激大鼠胰島β細(xì)胞INS-1來(lái)模擬體內(nèi)狀態(tài)，通過(guò)差異熒光雙向電泳的方法分析了INS-1胰島β細(xì)胞在對(duì)CM刺激前后蛋白表達(dá)譜的變化。并對(duì)候選蛋白進(jìn)行免疫印跡及免疫組化驗(yàn)證。 結(jié)果：發(fā)現(xiàn)并驗(yàn)證了5個(gè)與胰腺癌細(xì)胞刺激有關(guān)的蛋白，HSP60，Peripherin和Prp1