轉(zhuǎn)染VEGF的BMSC復(fù)合凍干骨組織工程骨研究.pdf

1、目前,深凍骨已商品化,免疫排斥反應(yīng)罕見發(fā)生,故該實(shí)驗(yàn)以凍干松質(zhì)骨作為基質(zhì)材料、轉(zhuǎn)染有血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)的骨髓基質(zhì)干細(xì)胞為種子細(xì)胞,這樣既保持了骨組織優(yōu)良的空間結(jié)構(gòu),又提供了種子細(xì)胞和血管化的刺激因子.希望能為骨缺損及缺血性骨病治療提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù).1.真核表達(dá)載體pcDNA<,3>/hVEGF<,165>的構(gòu)建目的:構(gòu)建一高效的真核表達(dá)載體,為下一步試驗(yàn)作準(zhǔn)備.方法:將PT<,7>Blue/hVEGF<,165>質(zhì)粒酶切

2、獲得hVEGF<,165>基因片段,構(gòu)建pcDNA<,3>/hVEGF<,165>真核表達(dá)載體,鑒定,擴(kuò)增并純化.結(jié)論:成功構(gòu)建出pcDNA<,3>/hVEGF<,165>真核表達(dá)載體.2.VEGF在兔BMSC內(nèi)的表達(dá)及其對(duì)BMSC的影響目的:構(gòu)建血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子pcDNA<,3>/hVEGF<,165>真核表達(dá)載體,并用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子轉(zhuǎn)染后對(duì)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的生長、轉(zhuǎn)化的影響.結(jié)論:轉(zhuǎn)染pcDN