川芎嗪對(duì)哮喘大鼠血清P選擇素及肺組織淋巴管生成作用的研究.pdf

1、目的：觀察不同時(shí)段哮喘大鼠血清P選擇素(P-selectin)及肺組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3 (vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-D(vascular endothelial growth factor-D，VEGF-D)的表達(dá)以及川芎嗪對(duì)三者的干預(yù)情況，探討血清 P 選擇素和肺組織VEGFR-3、VEGF-D在哮喘發(fā)病中的作用以及川芎嗪對(duì)血

2、清 P 選擇素及肺組織淋巴管生成(lymphangiogenesis)的影響和作用機(jī)制。 方法：將96只SD大鼠隨機(jī)分為6組，每組16只：正常對(duì)照組(A組)，哮喘模型組(B組)，地塞米松(C組)，川芎嗪小劑量干預(yù)組(D組)，川芎嗪大劑量干預(yù)組(E組)，聯(lián)合藥物干預(yù)組(F組)。通過腹腔注射卵蛋白并反復(fù)霧化吸入激發(fā)制備哮喘大鼠模型；分別在激發(fā)和干預(yù)后的一周和兩周時(shí)，取大鼠血清，通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)大鼠血清中P選擇素水平；取大鼠

3、肺組織，行免疫組織化學(xué)技術(shù)觀察其肺組織VEGFR-3及VEGF-D的表達(dá)；同時(shí)收集大鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)，進(jìn)行嗜酸性粒細(xì)胞(eosinophils，EOS)計(jì)數(shù)、細(xì)胞分類及血液EOS計(jì)數(shù)。 結(jié)果：(1)正常對(duì)照組大鼠血清P選擇素、肺組織VEGFR-3和VEGF-D弱表達(dá)。 (2)激發(fā)一周時(shí)，哮喘模型組與正常對(duì)照組相比，大鼠血清P選擇素、肺組織VEGFR-3和

4、VEGF-D表達(dá)顯著升高(P均<0.05)，隨著激發(fā)時(shí)間延至兩周時(shí)升高更加明顯(P均<0.001)。 (3)藥物干預(yù)后大鼠血清P選擇素的變化情況：①藥物干預(yù)一周時(shí)，各藥物干預(yù)組大鼠血清P選擇素的表達(dá)均高于正常對(duì)照組低于哮喘模型組(P均<0.001)，川芎嗪大劑量組與地塞米松組水平相接近(P>0.05)，且兩組的作用優(yōu)于川芎嗪小劑量組和聯(lián)合用藥組(P<0.05)；②藥物干預(yù)兩周時(shí)，與同組大鼠在一周時(shí)相比，各藥物干預(yù)組大鼠血清P選擇

5、素表達(dá)明顯降低(P均<0.001)，且川芎嗪大劑量組和地塞米松組接近正常對(duì)照組(P>0.05)；川芎嗪小劑量組和聯(lián)合用藥組顯著低于哮喘模型組(P<0.001)但仍高于正常對(duì)照組(P<0.05)。 (4)藥物干預(yù)后大鼠肺組織VEGFR-3的變化情況：①藥物干預(yù)一周時(shí)，川芎嗪各干預(yù)組大鼠肺組織VEGFR-3的表達(dá)顯著高于正常對(duì)照組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組(P均<0.05)，也高于哮喘模型組，但無明顯差異(P>0.05)；川芎嗪各干預(yù)

6、組間大鼠肺組織’VEGFR-3的表達(dá)相接近(P>0.05)；②藥物干預(yù)兩周時(shí)，與同組大鼠在一周時(shí)相比，川芎嗪各干預(yù)組大鼠肺組織VEGFR-3的表達(dá)繼續(xù)升高(P<0.001)，顯著高于正常對(duì)照組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組大鼠肺組織VEGFR-3的表達(dá)(P<0.001)，也高于哮喘模型組(P<0.05)；地塞米松組和聯(lián)合用藥組顯著低于哮喘模型組(P<0.001)，與正常對(duì)照組接近(P>0.05)。 (5)藥物干預(yù)后大鼠肺組織VEGF-

7、D的變化情況：①藥物干預(yù)一周時(shí)，各藥物干預(yù)組大鼠肺組織VEGF-D的表達(dá)高于正常對(duì)照組(P均<0.001)；川芎嗪各干預(yù)組大鼠肺組織VEGF-D的表達(dá)高于哮喘模型組、地塞米松組和聯(lián)合用藥組(P均<0.05)，川芎嗪各干預(yù)組間大鼠肺組織VEGF-D表達(dá)相接近(P>0.05)；地塞米松組和聯(lián)合用藥組大鼠肺組織VEGF-D表達(dá)相接近(P>0.05)，均顯著低于哮喘模型組([均<0.05)；②藥物干預(yù)兩周時(shí)，與同組大鼠在一周時(shí)相比，川芎嗪各干預(yù)

8、組大鼠肺組織VEGF-D的表達(dá)明顯下調(diào)(P均<0.001)；各藥物干預(yù)組大鼠肺組織VEGF-D表達(dá)均高于正常對(duì)照組且顯著低于哮喘模型組(P均<0.001)，各藥物干預(yù)組間無明顯差異(P>0.05)； (6)川芎嗪各干預(yù)組大鼠血液和BALF中EOS的數(shù)目及BALF中淋巴細(xì)胞的比例均低于哮喘模型組(P<0.001)，川芎嗪大劑量組與地塞米松組、聯(lián)合用藥組相比，血液和BALKF中EOS的數(shù)目及BALF中淋巴細(xì)胞的比例無顯著差異(P>

9、0.05)，川芎嗪大劑量組與川芎嗪小劑量組相比，血液和BALF中EOS的數(shù)目及BALF中淋巴細(xì)胞的比例無顯著差異(P>0.05)。 (7)哮喘模型組大鼠血清中EOS及BALF中炎性細(xì)胞與正常對(duì)照組相比均顯著增多(P均<0.05)，哮喘大鼠血清P選擇素水平與血清中EOS及BLAF中炎性細(xì)胞的比例均呈顯著正相關(guān)(P均<0.01)；哮喘大鼠肺組織’VEGF-D的表達(dá)與血清P選擇素水平及血液和BALF中EOS計(jì)數(shù)呈顯著正相關(guān)(P均<0

10、.01)：在激發(fā)大鼠哮喘兩周時(shí)，哮喘大鼠肺組織VEGFR-3和VEGF-D的表達(dá)呈顯著正相關(guān)(P<0.01)。 結(jié)論：哮喘大鼠血清P選擇素過量表達(dá)與哮喘的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，并在早期即參與哮喘的發(fā)病；血清P選擇素的表達(dá)與炎性細(xì)胞向肺部炎癥部位的浸潤(rùn)密切相關(guān)。當(dāng)哮喘大鼠氣道炎癥加劇時(shí)，可導(dǎo)致淋巴管生成的抑制或破壞，可以引起支氣管黏膜水腫，從而導(dǎo)致通氣障礙的惡化。川芎嗪可通過抑制P選擇素的過量表達(dá)而阻止哮喘炎癥的進(jìn)一步發(fā)展，此抑制作用