小空間細顆粒馴養(yǎng)對青少年恒河猴視覺系統(tǒng)發(fā)育影響及機制的研究.pdf

1、近視眼是一種多病因的眼部疾病,它在人群中尤其是青少年中有著很高的發(fā)病率且呈逐年上升的趨勢:是造成青少年低視力的主要因為。就發(fā)病機制而言可簡單將其分為兩大類:一類是發(fā)病率較低的病理性近視,具有明確的家族史和遺傳突變的基因定位以及發(fā)病年齡早、近視度數(shù)高等特點,部分還伴有眼部發(fā)育的異常。另一類則是當今社會最為關(guān)注的青少年單純性近視,其多發(fā)生于學齡期青少年兒童,沒有確切的基因定位和家族遺傳史,病因不明確,故在其發(fā)病機制方面始終存在多種假說。自上

2、世紀80年代發(fā)現(xiàn)教育程度高的人群近視眼發(fā)病率遠高于教程度低的人群以來,環(huán)境因素在單純性近視發(fā)病機制中的影響就引起了人們的廣泛關(guān)注。因此近年來大量關(guān)于近視眼與生活環(huán)境、視近時間、視近強度、及戶內(nèi)戶外活動時間比例相關(guān)性的研究工作和流行病學調(diào)查在廣泛開展,但其結(jié)論卻不甚明確,很多問題都有待進一步的實驗研究加以證實。此外現(xiàn)有的近視眼動物模型多為單眼的離焦性或形覺剝奪性動物模型,其雖可誘導(dǎo)眼軸的被動加長,但其機制與青少年單純性近視發(fā)病機制完全不同

3、,缺乏環(huán)境因素對近視發(fā)病機制的直接證據(jù)及模擬人類近視發(fā)病過程的近視眼動物模型。
　　 本研究選取與人類生長發(fā)育階段極為相似的靈長類動物恒河猴為研究對象,采用小空間馴養(yǎng)強制性長時間近距離注視的方法,全程模擬青少年單純性近視的發(fā)病過程,以其獲得青少年恒河猴的單純性近視眼動物模型,為青少年單純性近視眼的發(fā)生機制提供良好的近視眼動物模型。同時聯(lián)合PRK技術(shù),使部分恒河猴獲得一定的單眼或雙眼離焦量和屈光參差量,以觀察長時間近距離注視對不同

4、屈光狀態(tài)下青少年恒河猴視覺系統(tǒng)發(fā)育的影響,并與單純性近視眼動物模型進行對比分析,以其更好地說明青少年單純性近視的發(fā)生發(fā)展機制并對其防治進行初步的研究。
　　 研究目的:
　　 采用小空間馴養(yǎng)強制性長時間視近的方法盡力完全模擬人類單純性近視眼發(fā)病過程的行為學近視眼動物模型；并觀察小空間馴養(yǎng)對不同屈光狀態(tài)下的青少年恒河猴視覺系統(tǒng)發(fā)育的影響。
　　 材料和方法:
　　 選健康青少年恒河猴16只,隨機分為五4組；

5、所有恒河猴均于15.20月齡時入組進行初次檢測和數(shù)據(jù)收集,整個檢測周期為24個月。每組采用不同的處理方式:A組:小空間馴養(yǎng)+雙眼3.00D遠視離焦；B組:單純小空間馴養(yǎng)；C組:常規(guī)飼養(yǎng)(空白對照組)；D組:小空間馴養(yǎng)+右眼3.00D遠視離焦。所有恒河猴均采取12/12小時晝夜光照節(jié)律變化,其中除C組常規(guī)全天飼養(yǎng)于視覺開放式普通猴籠內(nèi),其余各組每天8h飼養(yǎng)于大小固定、照明通風條件良好的視覺封閉式特制猴籠內(nèi),食物處理成小顆粒狀需注意翻找才能

6、獲得,以訓(xùn)練其用眼注視細小物體。將A、D兩組,按照預(yù)先設(shè)定方案分別進行手術(shù)處理以達到+3.00D的屈光值。定期檢測各項指標:C組作為對照組,定期進行一次睫狀肌麻痹檢影和眼部A超測厚檢查；A、B、C、D組同步進行檢測,檢測周期為PRK術(shù)前1W,術(shù)后1W,術(shù)后2W,術(shù)后3月,術(shù)后6月,術(shù)后9月,術(shù)后12月,術(shù)后15月,術(shù)后18月和術(shù)后24月,檢測項目包括睫狀肌麻痹檢影,眼部A超測厚檢查,眼壓測量,角膜地形圖檢查,角膜曲率檢查,視網(wǎng)膜電圖(E

7、RG)檢查,視神經(jīng)纖維層厚度測量(OCT)等,最終采用SPSS13.0軟件對數(shù)據(jù)進行處理分析,以動態(tài)觀察各種不同干預(yù)條件下青少年恒河猴眼球生長和屈光度變化的情況。
　　 實驗結(jié)果:
　　 1.眼壓及PRK術(shù)后角膜上皮恢復(fù)情況:整個觀察周期內(nèi)全部恒河猴的眼壓測量值均顯示在10到15mmHg之間,且左右眼配對T檢驗均無顯著性差異；所有PRK術(shù)的恒河猴于術(shù)后4天角膜上皮完全修復(fù),角膜組織完全恢復(fù)透明,沒有出現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)和角

8、膜混濁現(xiàn)象。
　　 2.屈光狀態(tài)、玻璃體腔長度及角膜曲率變化情況:根據(jù)分組處理情況:先將A、B、C組進行組間對照分析。A、B、C三組的恒河猴的處理過程均保持其個體雙眼無明顯屈光參差表現(xiàn)；因此三組間進行比較可避免屈光參差等因素所導(dǎo)致的干擾,其中B組和C組之間的比較僅體現(xiàn)小空間馴養(yǎng)對恒河猴視覺系統(tǒng)發(fā)育的影響,A組和B組的比較則顯示不同屈光狀態(tài)下小空間馴養(yǎng)對眼球發(fā)育的影響。結(jié)果顯示:在觀察周期內(nèi)C組在開放性空間飼養(yǎng)過程中的玻璃體腔長度

9、沒有明顯增長；A、B組在封閉式小空間馴養(yǎng)每天8h強制性近距離注視訓(xùn)練,兩組玻璃體長度都有顯著性增長；其中以A組增長最為顯著。將各組問玻璃體腔生長速率兩兩比較顯示小空間馴養(yǎng)各組的玻璃體腔生長速率均明顯快于常規(guī)飼養(yǎng)組,重復(fù)測量方差分析顯示其有顯著性差異；其中以小空間馴養(yǎng)+雙眼3.00遠視離焦的A組生長速率最快,明顯快于B、C組；D組(小空間馴養(yǎng)+右眼3.00D遠視離焦)進行組內(nèi)左右眼配對T檢驗顯示兩組左右眼間玻璃體腔生長速率有顯著性差異。<

10、br>　　 角膜曲率變化情況顯示B、C組角膜曲率值穩(wěn)定性良好,A、D各組在PRK術(shù)后有相應(yīng)的變化過程,但都在3個月內(nèi)趨于穩(wěn)定,與對側(cè)眼呈同步變化趨勢。
　　 3.ERG檢測結(jié)果:恒河猴各時期的視網(wǎng)膜電反應(yīng)潛伏期均與人類相似,在24個月的觀察周期內(nèi)各組左右眼間的電生理反應(yīng)一致性均良好,隨時間推移沒有因玻璃體和眼軸的加長出現(xiàn)明顯的減弱或增強；與正常人類相比,其暗適應(yīng)狀態(tài)下25db弱光刺激下的暗視視桿細胞反應(yīng)及0db強光刺激下的混合

11、最大反應(yīng)中b波波幅均明顯小于正常人類,而在明視視錐細胞反應(yīng)中二者間則無明顯差異;由此提示我們恒河猴視網(wǎng)膜電反應(yīng)與人類有極大的相似性,但在暗適應(yīng)狀態(tài)下的電反應(yīng)值弱于正常人類。
　　 4.視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層厚度檢測結(jié)果:恒河猴各象限的神經(jīng)纖維厚度分布與正常人類相似,在上方和下方神經(jīng)纖維層較厚,顳側(cè)和鼻側(cè)象限偏薄,以鼻側(cè)為最薄；各象限值與正常人類比較顯示上方和顥側(cè)象限較正常人類為薄,下方和鼻側(cè)象限則無顯著性差異。同時在24個月的觀察周期

12、內(nèi)各組左右眼間的視神經(jīng)纖維層厚度一致性良好,隨時間推移亦沒有因玻璃體和眼軸的加長出現(xiàn)明顯的變薄。
　　 結(jié)論:
　　 1.長時間近距離注視可以使雙眼玻璃體腔的生長加速,且一定程度的雙眼遠視性離焦與其有協(xié)同作用
　　 2.小空間細顆粒馴養(yǎng)(強制性長時間近距離注視)是一種潛在的自然近視眼動物模型的建立方法
　　 3.健康青少年恒河猴與正常人類的視覺系統(tǒng)極為相似,且左右眼發(fā)育同步性良好,是研究近視眼發(fā)病機制的最