聚乳酸-聚乙醇酸支架種植自體細胞構(gòu)建組織工程食管替換犬頸段食管的實驗研究.pdf

1、目的：分離、培養(yǎng)、擴增犬自體種子細胞，自體骨髓間充質(zhì)干細胞誘導(dǎo)分化為上皮樣細胞；設(shè)計制作人工生物可降解支架；將自體種子細胞種植于支架上構(gòu)建組織工程食管；以組織工程食管移植替代犬部分頸段食管。方法：體外培養(yǎng)自體食管上皮細胞和肌成纖維細胞，自體骨髓間充質(zhì)干細胞以表皮生長因子誘導(dǎo)分化，免疫細胞化學(xué)等鑒定；聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)材料以粒子浸出法結(jié)合模壓或注塑成型制作多孔支架，進行組織學(xué)、電鏡等檢測；靜態(tài)和動態(tài)種植細胞于支架上，培養(yǎng)構(gòu)建組織

2、工程食管，進行組織學(xué)、免疫組化、電鏡等檢測；以組織工程食管置入替換部分犬頸段食管，胃造瘺給予營養(yǎng)，不同時間點處死取材進行檢測。結(jié)果：成功分離并培養(yǎng)擴增了自體種子細胞，骨髓間充質(zhì)干細胞可以誘導(dǎo)分化為上皮樣細胞，其細胞角蛋白及上皮膜抗原免疫細胞化學(xué)染色陽性；PLGA支架有一定力學(xué)強度，孔隙率90％左右，孔徑180～280μm；種子細胞在PLGA支架上黏附生長良好，體外可成功構(gòu)建組織工程食管；術(shù)后犬長期存活，人工食管早期輕度擴張，后趨于正常，