縫隙連接蛋白43和基質(zhì)金屬蛋白酶9在大鼠腦損傷中的表達及與創(chuàng)傷性腦水腫相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探究大鼠在顱腦損傷(TBI)后腦組織中縫隙連接蛋白43(Connexin43，Cx43)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)的表達變化規(guī)律及兩者與創(chuàng)傷性腦水腫演變的關(guān)系;研究Cx43和MMP9在TBI后表達變化有無相關(guān)性。
　　 方法：健康成年雌性SD大鼠96只(由鄭州大學(xué)實驗動物中心提供)，體重280-320g。將96只大鼠按照完全隨機數(shù)字表法分為刨傷組(實驗組)和假手術(shù)組(對照組)，每組48只，兩組再依據(jù)手術(shù)后處死時間點隨機

2、分為術(shù)后0.5h、1h、3h、6h、12h、24h、3d、7d八個小組，每小組6只。建立Feeney自由落體撞擊法大鼠腦損傷模型，依據(jù)設(shè)定好的時間點取腦組織，以干/濕重法檢測大鼠TBI后腦組織含水量(BWC)即腦水腫的變化;不同時相取得腦組織行HE染色觀察TBI后大鼠腦組織病理變化;免疫組織化學(xué)、Western-blot定量分析兩種方法測定TBI后腦組織中Cx43和MMP9的表達值變化規(guī)律;研究TBI后Cx43和MMP9的表達與腦水腫的

3、變化關(guān)系，探究Cx43和MMP9在腦水腫的作用;分析Cx43和MMP9的表達變化的關(guān)系。
　　 結(jié)果：⑴干/濕重法測得TBI后3h創(chuàng)傷組腦組織含水量開始增高(與對照組比較P＜0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義)，至24h達最高峰，持續(xù)至傷后7d腦含水量仍高于對照組。⑵HE染色見TBI后創(chuàng)傷組各時間點創(chuàng)傷灶周圍腦組織損傷，至24h及3d組，細胞變性、膨脹、破裂明顯，7d組較前恢復(fù)，腫脹細胞較前減少，但仍未恢復(fù)正常。⑶Western-blo

4、t蛋白檢測顯示TBI后腦組織Cx43在損傷后0.5h表達下降(與對照組比較P＜0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義)，1h開始表達增加(P＜0.05)，并隨時間推移逐漸升高，至24h達最高，隨后逐漸下降，至7d組仍高于對照組;MMP9表達在損傷后0.5h即開始增加(與對照組比較P＜0.05)，此后表達值逐步升高，至3d組達高峰，后逐漸下降，至7d組表達值仍高于對照組(P＜0.05);免疫組化檢測TBI后Cx43和MMP9表達值與Western-b

5、lot檢測值基本一致。⑷TBI后腦組織中Cx43和MMP9的表達值和腦組織含水量即腦水腫程度均存在正相關(guān)(r1=0.933，P1＜0.05，r2=0.903，P2＜0.05，r3=0.886，P3＜0.05，r4=0.680，P4＜0.05)。⑸TBI后腦組織中Cx43和MMP9的表達值存在正相關(guān)(r1=0.938，P1＜0.05,r2=0.911,P2＜0.05)。
　　 結(jié)論：TBI后Cx43表達先下降，后逐步增加，MMP9