髓系細胞觸發(fā)受體-1在實驗性變態(tài)反應性神經(jīng)炎中的表達及作用.pdf

1、目的：吉蘭-巴雷綜合征(Guillain-BarreSyndrome，GBS)是一種自身免疫性疾病，目前病因和發(fā)病機制尚不十分清楚。實驗性變態(tài)反應性神經(jīng)炎(experimentalallergicneuritis，EAN)是一種自身抗原特異性、由T細胞介導的炎癥性周圍神經(jīng)病，是研究GBS的理想動物模型。髓系細胞觸發(fā)受體-1(triggeringreceptorexpressedonmyeloidcells1，TREM-1)是最新發(fā)現(xiàn)的一

2、種細胞表面天然免疫受體，在天然免疫和后天免疫中有重要作用。細胞因子有參與免疫應答與免疫調(diào)節(jié)的作用，IL-1β和TNF-α都是單核細胞炎性細胞因子，以往研究表明兩者均與EAN的發(fā)生有關(guān)。
　　 本實驗應用該抑制性LP-17，即TREM-1拮抗劑對EAN的發(fā)病進行干預，觀察其對EAN大鼠發(fā)病的影響，并檢測TREM-1，IL-1β、TNF-α在EAN大鼠坐骨神經(jīng)和外周血中的動態(tài)表達，旨在發(fā)現(xiàn)EAN中是否存在TREM-1的表達異常，探討

3、TREM-1在EAN中的作用，為尋找新的治療自身免疫性疾病的策略奠定理論基礎。
　　 方法：64只Lewis大鼠，SPF級，雄性，6-8周，體重160-180g，隨機分為：生理鹽水組、完全弗氏佐劑組、EAN組、LP17干預組。
　　 EAN模型的建立：首先制備抗原乳劑，其流程如下：以NS溶解大鼠用周圍神經(jīng)髓鞘蛋白P253-78，再與完全弗氏佐劑充分混勻成乳劑（其中P2濃度為200μg/200μL）；各組處理如下：NS組大

4、鼠以NS代替抗原乳劑注射(200μL/只)；EAN組每只大鼠注射200μL抗原乳劑，佐劑組大鼠以NS和CFA等體積混勻的乳劑200μL注射，LP17干預組大鼠免疫同時給予腹腔注射LP17(4mg/kg)500ul。免疫部位為：雙后肢足掌皮下。
　　 觀察實驗大鼠的發(fā)病情況，分別在第7天，第16天，第24天，第33天處死動物，取坐骨神經(jīng)根經(jīng)HE染色和weil's染色觀察其病理改變，RT-PCR檢測TREM-1、IL-1β和TNF-

5、α的mRNA表達水平。
　　 結(jié)果：EAN組大鼠在免疫后第16天癥狀達高峰，第33天基本好轉(zhuǎn)。LP17干預組大鼠臨床癥狀比EAN組明顯降低，且病程縮短。與對照組相比，EAN組大鼠TREM-1mRNA在發(fā)病初即表達增高(p<0.05)，高峰期上升明顯(p<0.01)，在恢復早期和恢復晚期表達回落，但仍高于NS組(p<0.05)；與對照組相比，EAN組大鼠各組織各時間點IL-1β和TNF-αmRNA表達均升高，LP17干預組IL-1