PPAR-γ調(diào)控豬頸動(dòng)脈支架植入術(shù)后血管重構(gòu)作用及機(jī)制初步研究.pdf

1、研究目的:
　　探討過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ(peroxisome proliferator activated receptors-γ,PPAR-γ)在豬頸動(dòng)脈支架植入術(shù)后血管重構(gòu)中的作用及機(jī)制。
　　材料與方法:
　　將12只小型豬分為正常對(duì)照組(n=4)和介入手術(shù)組(n=8),介入手術(shù)組采用豬頸動(dòng)脈支架植入建立動(dòng)物模型,并隨機(jī)分為支架組(n=4)和羅格列酮(ROSI)組(n=4)。術(shù)后3月,應(yīng)用數(shù)字減影血管

2、造影技術(shù)(digital subtraction angiography,DSA)及HE染色評(píng)估血管形態(tài)學(xué)變化,應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)NF-κB及 P-akt的表達(dá)變化,應(yīng)用Western blot技術(shù)檢測(cè)支架段血管PPAR-γ、P-Akt、Akt、及NF-κB的表達(dá)變化,應(yīng)用掃描電鏡技術(shù)觀察支架內(nèi)皮化情況。
　　結(jié)果:
　　1.DSA結(jié)果顯示:支架植入術(shù)后3月,正常對(duì)照組頸動(dòng)脈粗細(xì)一致;支架組支架植入處頸動(dòng)脈明顯變細(xì),顯

3、影劑充盈缺損,管腔明顯變窄;ROSI組支架植入處顯影劑充盈度好,管腔與正常對(duì)照組相比未見(jiàn)顯著狹窄。
　　2.HE染色結(jié)果顯示:正常頸動(dòng)脈血管外中膜層彈力纖維排列有序,內(nèi)外彈力層完整,內(nèi)膜均勻一致,血管管壁無(wú)增厚。支架植入術(shù)后3月,支架組頸動(dòng)脈外膜薄層疏松結(jié)締組織排列基本有序,中膜彈力纖維排列紊亂,部分內(nèi)中膜分離,內(nèi)彈力層凹凸不平、局部變形、斷裂及結(jié)構(gòu)破壞,支架與血管內(nèi)膜疏松結(jié)合,支架表面新生內(nèi)膜增生明顯;ROSI組頸動(dòng)脈外膜薄層疏

4、松結(jié)締組織和中膜彈力纖維排列基本有序,中膜于支架梁下方變薄,內(nèi)彈力層纖維排列基本完整,支架與血管內(nèi)膜緊密結(jié)合,支架表面新生內(nèi)膜輕度增生。與正常對(duì)照組相比,支架組頸動(dòng)脈血管狹窄約(25.41±2.97)％,ROSI組頸動(dòng)脈血管狹窄約(14.60±4.27)%,支架組血管狹窄明顯重于ROSI組(p<0.01)。
　　3.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示:支架植入后3月,正常對(duì)照組頸動(dòng)脈血管壁NF-κB幾乎不表達(dá),與正常對(duì)照組相比,支架組NF-

5、κB的表達(dá)明顯增高,達(dá)4.63±0.52(p<0.01),ROSI組NF-κB的表達(dá)輕度增高,達(dá)2.13±0.35(p<0.01),支架組NF-κB表達(dá)明顯高于ROSI組(p<0.01);同樣在支架植入后3月,正常對(duì)照組P-akt表達(dá)為0.88±0.64,支架組P-akt表達(dá)明顯增加達(dá)4.63±0.52(p<0.01),ROSI組P-akt的表達(dá)輕度增加,達(dá)2.13±0.64(p<0.01),支架組P-akt表達(dá)明顯高于ROSI組(p<

6、0.01)。
　　4.Western blot結(jié)果顯示:支架組PPAR-γ蛋白表達(dá)水平較正常對(duì)照組明顯降低(0.4822±0.0538 vs0.1651±0.0431,p<0.01),NF-κB和P-Akt蛋白表達(dá)水平較正常對(duì)照組明顯增加(0.0470±0.0338 vs0.3984±0.0474;O.2688±0.0435 vs0.3297±0.0437;p<0.05);ROSI組PPAR-γ蛋白表達(dá)水平與正常對(duì)照組無(wú)顯著差異(

7、0.4310±0.0412 vs0.4822±0.0538,p>0.05),NF-κB蛋白表達(dá)水平較正常對(duì)照組輕度增高(0.0470±0.0338 vs0.1909±0.0492;p<0.01);ROSI組PPAR-γ蛋白表達(dá)水平較支架組明顯增加(0.1651±0.0431 vs0.4310±0.0412,p<0.01),NF-κB和P-Akt蛋白表達(dá)水平較支架組明顯降低(0.3984±0.0474 vs0.1909±0.0492;0.

8、3297±0.0437 vs0.0738±0.0302;p<0.01);Akt在正常對(duì)照組、支架組和 ROSI組中的蛋白表達(dá)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.3238±0.0370 vs0.3645±0.0422 vs0.3540±0.0382;p>0.05)。
　　5.掃描電子顯微鏡檢測(cè)結(jié)果顯示:正常對(duì)照組內(nèi)膜完整,管腔無(wú)增厚;支架組新生內(nèi)膜內(nèi)皮化不良及新生內(nèi)膜增生明顯;ROSI組新生內(nèi)膜內(nèi)皮化完全,新生內(nèi)膜輕度增生。
　　結(jié)論: