MTAP在人BEP2D細胞輻射致癌模型和非小細胞肺癌中的缺失和表達研究.pdf

1、中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院放射醫(yī)學研究所博士學位論文MTAP在人BEP2D細胞輻射致癌模型和非小細胞肺癌中的缺失和表達研究姓名：李邦印申請學位級別：博士專業(yè)：衛(wèi)生毒理學指導教師：吳德昌20030601軍事醫(yī)學科學院衛(wèi)生毒理學專業(yè)博士學位論文2003年6月MTAP在人BEP2D細胞輻射致癌模型和非小細胞肺癌中的缺失與表達研究摘要在自然環(huán)境中，天然輻射的50％來自于氡及其子體放射出來的a粒子，高水平的氡及其子體是誘發(fā)原發(fā)性肺癌的重要因素之

2、一。對此，盡管人們已有深刻認識，但是時至今日氡及其子體誘發(fā)肺癌的分子機理仍未完全闡明。本實驗室采用人支氣管上皮細胞BEP2D建立了a粒子輻射致惡性轉化的細胞模型，照射后第35代細胞接種于裸鼠皮下可形成高分化的鱗癌，繼續(xù)分離培養(yǎng)獲得了BERP35T1BERP35T6多株惡性轉化的單克隆細胞，在國內率先開展了輻射致肺癌機制的研究。蛋白質組水平的研究發(fā)現(xiàn)，BEP2D永生化細胞和BERP35惡性轉化細胞中有多種蛋白質存在表達差異，其中MTAP、

3、HMG1在惡轉細胞中表達降低，而Maspin在癌前階段表達下降。在此基礎上，我們以BEP2D細胞為對照，通過雙向電泳技術對惡性程度更高的BERP35T2細胞進行分析，并通過Northern雜交發(fā)現(xiàn)在BERP35T2中MTAP的mRNA表達水平比BEP2D細胞中降低5倍以上。MTAP(MethylthioadenosinePhosphorylase，甲硫腺苷磷酸化酶)，是甲硫氨酸和嘌呤合成補救途徑的第一個酶，專門司職催化多胺代謝的副產(chǎn)物M

4、TA(Methylthioadenosine，甲硫腺苷)，使之生成腺嘌呤和甲硫核糖一1磷酸(5methylthioDribose1_phosphate，MTR1P)，_最后形成ATP、dAMP和甲硫氨酸，分別參與細胞的能量合成、DNA合成和蛋白質合成。MTAP催化的是可逆反應，在正常細胞中有非常重要的作用。關于MTAP基因在肺癌或BEP2D輻射致癌細胞模型中的研究，在國內并無相關報道，這促使我們圍繞MTAP基因組及其鄰近基因(組)結構在