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文檔簡介
1、本試驗主要研究中藥復方和益生素對熱應激大鼠腸道菌群結構與多樣性的影響。旨在探討大鼠熱應激與腸道菌群變化的關系,進而為中藥復方和益生素干預熱應激的作用機制提供理論依據(jù)。
實驗大鼠80只隨機分成四組,每組20只,分別為中藥組、益生素組、熱應激組和適溫組。中藥組在熱應激下按7mg/kg·BW大鼠重量灌服復方口服液,益生素組在熱應激下灌服與中藥組等體積的0.04%益生素。在熱應激后3h、1d、3d、7d進行采血,測定大鼠直腸溫度、外周
2、血白細胞濃度、血液生化指標、血清皮質醇濃度和 HSP70含量,觀察小腸黏膜形態(tài),并采其盲腸內容物,通過提取基因組總 DNA、構建測序文庫、Illumina MiSeq測序,得出高質量測序數(shù)據(jù),進行生物信息學分析中藥復方和益生素對動物熱應激下腸道菌群結構與多樣性的變化。試驗結果如下:
熱應激各時間段,中藥組、益生素組和適溫組大鼠的直腸溫度顯著低于熱應激組(P<0.05);試驗在3h、1d、7d時,中藥組、益生素組和適溫組大鼠白細
3、胞濃度均顯著低于熱應激組(P<0.05);熱應激3h,中藥組和益生素組ALB含量顯著高于熱應激組(P<0.05),熱應激組ALT和AST含量與適溫組相比極顯著升高(P<0.01),中藥組和益生素組的大鼠血糖含量均分別與熱應激組和適溫組相比極顯著降低(P<0.01);熱應激7d,中藥組、益生素組和適溫組TP和ALB含量極顯著高于熱應激組(P<0.01),且ALT、AST含量均極顯著低于熱應激組(P<0.01),與熱應激組相比,中藥組、益生
4、素組和適溫組血糖濃度極顯著下降(P<0.01)。
中藥組十二指腸部分腸絨毛上皮細胞變性,脫落;空腸和回腸無明顯病變。益生素組和適溫組小腸各段無明顯組織學變化。熱應激組十二指腸部分腸絨毛嚴重變性,脫落;空腸腸絨毛上皮細胞變性,部分腸絨毛斷裂,脫落;回腸基底層部分腸絨毛斷裂,脫落。
試驗在第1d、3d、7d,中藥組、益生素組和適溫組血清皮質醇濃度顯著(P<0.05)和極顯著低于熱應激組的血清皮質醇濃度(P<0.01);在
5、試驗3h和3d,中藥組、益生素組和適溫組血清HSP70濃度均極顯著低于熱應激組(P<0.01)。
中藥組和益生素組腸道菌群 Chao1指數(shù)和 Shannon指數(shù)顯著高于熱應激組(P<0.05),熱應激組Chao1指數(shù)和PD_whole_tree指數(shù)顯著低于適溫組(P<0.05);PCA和PCoA的分析顯示,中藥組、益生素組和熱應激組的腸道菌群開始出現(xiàn)差異性,呈分開趨勢,熱應激7d,適溫組與其余三個組的散點、熱應激組與其余三個組
6、散點,還有適溫組與熱應激組散點完全分開,而中藥組與益生素組的散點基本交疊。
熱應激下腸道微生物一些優(yōu)勢菌屬發(fā)生了變化,厚壁菌和擬桿菌的菌屬相對減少(P>0.05),乳酸菌屬極顯著減少(P<0.01),梭菌屬增加,中藥組擬桿菌屬和益生素組的乳酸菌屬與熱應激組相比顯著升高(P<0.05)。
功能基因的KEGG統(tǒng)計分析可知,熱應激組在糖代謝、氨基酸代謝和膜轉運的基因表達活躍,中藥組、益生素組和適溫組各生物途徑相似,且中藥組
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