隔日禁食對非酒精性脂肪性肝病大鼠肝功能及血脂代謝的影響.pdf

1、目的:非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholicfattyliverdisease，NAFLD)的發(fā)生率隨著人們生活方式的改變不斷增高。目前，NAFLD的主要治療方法包括非藥物治療和藥物治療。非藥物治療包括運動鍛煉、減少熱量攝入、減小腰圍、控制體質(zhì)量等生活方式的改變，藥物治療包括胰島素增敏劑、他汀類等。NAFLD與飲食結(jié)構(gòu)不合理所致的營養(yǎng)失衡密切相關(guān)，單純依靠藥物治療，效果并不理想。飲食干預(yù)能否安全有效的延緩，甚至阻止NAFLD的進(jìn)展

2、值得深入、廣泛地探索。
　　間斷性禁食(intermittentfasting，IF)是一種新形式的飲食方案，通常采用隔日禁食(alternatedayfasting，ADF)的方式，即空腹1日，再自由飲食1日。國外研究資料表明，ADF具有降低空腹血糖和胰島素濃度、改善胰島素抵抗的作用，以及降低心率、血壓、血清總膽固醇和甘油三酯，提高高密度脂蛋白濃度的效應(yīng)。但其具體作用機制目前尚不清楚，有待進(jìn)一步研究。另一種飲食干預(yù)-熱量限制(c

3、aloricrestriction，CR)，具有相似的作用，并且國內(nèi)外相關(guān)研究已較多。自CR能延緩衰老的學(xué)說提出以來，其生物學(xué)效應(yīng)越來越引起人們的重視。研究表明，CR可以減輕體重，下調(diào)血壓，提高胰島素敏感性，降低膽固醇水平，并且可以使老齡動物的一些生理狀態(tài)恢復(fù)到年輕時的水平，如對外界刺激反應(yīng)的敏感性等。本實驗以持續(xù)高脂飲食建立大鼠NAFLD模型，以不同飲食干預(yù)方式為對照，觀察ADF對NAFLD大鼠肝功能及血脂代謝的影響，探索該飲食方案的

4、有效性和可行性，為臨床有效的防治NAFLD提供新的方法和實驗依據(jù)。
　　方法:選用健康雄性50只Wistar大鼠，隨機分為空白對照組（12只）和模型組（38只）。后者以高脂飼料飼養(yǎng)建立NAFLD大鼠模型，8周末，每組隨機處死2只，以證實造模成功，后再將模型組大鼠隨機分為四組:對照組(n=9)，給予標(biāo)準(zhǔn)飼料自由飲食;ADF組(n=9)，給予標(biāo)準(zhǔn)飼料隔日禁食;CR組(n=9)，給予標(biāo)準(zhǔn)飼料，熱量攝入量為對照組的60％;高脂組(n=9)

5、，給予高脂飼料自由飲食?？瞻讓φ战M剩余10只，給予標(biāo)準(zhǔn)飼料自由飲食。各組大鼠分籠喂養(yǎng)，自由飲水。12周末處死所有大鼠，采集血清標(biāo)本，檢測血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)、體質(zhì)量、肝指數(shù)及肝組織病理學(xué)。
　　1、大鼠一般情況觀察:觀察記錄大鼠

6、一般情況，如精神、活動、進(jìn)食情況、毛發(fā)、體重變化等。
　　2、肝臟組織病理學(xué)觀察:HE染色觀察肝臟脂肪變、炎癥活動及氣球樣變程度。
　　3、大鼠體質(zhì)量及肝指數(shù)的測定:稱大鼠體質(zhì)量及肝濕重，計算肝指數(shù)（肝濕重/體質(zhì)量）。
　　4、大鼠血清肝功能及血脂水平的檢測:丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)，應(yīng)用全自動生化分析儀，酶法測定?？偰懝檀?TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白

7、膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)，應(yīng)用全自動生化分析儀，采用終點比色法及終點法測定。
　　5、統(tǒng)計學(xué)分析:實驗數(shù)據(jù)采用SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，檢測數(shù)據(jù)正態(tài)性及方差齊性，多組間比較采用單因素方差分析，各組間比較采用Student-Newman-Keuls檢驗，以P＜0.05為具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、實驗動物一般情況觀察:空白對照組大鼠活潑，

8、毛發(fā)有光澤。對照組大鼠活動減少，毛發(fā)欠光澤，食欲可，體重逐漸增加。ADF組和CR組大鼠活動增加，反應(yīng)靈敏，毛發(fā)光澤，睡眠、食欲佳，體重略增加。高脂組大鼠形體肥胖，活動少且遲緩，毛發(fā)發(fā)黃、蓬亂，攝食增多，睡眠增多，體重明顯增加。ADF組及CR組大鼠一般情況較高脂組明顯改善。
　　2、肝臟組織病理學(xué)觀察:空白對照組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝板排列整齊，無脂肪變性。高脂組大鼠肝細(xì)胞內(nèi)可見大小不等、數(shù)量不一的脂肪滴空泡，可將細(xì)胞核擠壓向胞膜，

9、炎癥細(xì)胞浸潤。ADF組和CR組大鼠肝組織肝小葉結(jié)構(gòu)完整，無變性壞死、炎性細(xì)胞浸潤及纖維組織增生，僅個別細(xì)胞內(nèi)有少量脂滴。對照組大鼠肝組織結(jié)構(gòu)尚完整，肝小葉結(jié)構(gòu)可，少許肝細(xì)胞內(nèi)可見大小不等、數(shù)量不一的脂肪滴空泡，少許炎性細(xì)胞浸潤，未見纖維組織增生。ADF組及CR組大鼠肝組織損傷程度較高脂組明顯減輕。
　　3、大鼠體質(zhì)量及肝指數(shù)的測定:高脂組大鼠體質(zhì)量、肝指數(shù)較空白對照組顯著升高(P＜0.05);ADF組、CR組體質(zhì)量、肝指數(shù)較高脂組

10、顯著降低(P＜0.05);ADF組、CR組體質(zhì)量、肝指數(shù)較對照組顯著降低(P＜0.05);ADF組體質(zhì)量較CR組顯著降低(P＜0.05)，而ADF組肝指數(shù)與CR組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　4、大鼠血清肝功能水平的檢測:高脂組大鼠血清ALT、AST、ALP較空白對照組顯著升高(P＜0.05);ADF組、CR組ALT、AST、ALP較高脂組顯著降低(P＜0.05);ADF組ALT、AST、ALP較對照組顯著降低(P＜0.05);AD

11、F組ALP較CR組顯著降低(P＜0.05)，而ADF組ALT、AST與CR組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　5、大鼠血脂水平的檢測:高脂組大鼠血清TC、TG、LDL、VLDL較空白對照組顯著升高(P＜0.05)，HDL-C較空白對照組顯著降低(P＜0.05);ADF組、CR組大鼠血清TC、TG、LDL、VLDL較高脂組顯著降低(P＜0.05)，HDL-C較高脂組顯著升高(P＜0.05);ADF組大鼠血清TC、TG、LDL、VLDL較對

12、照組顯著降低(P＜0.05)，HDL-C較對照組顯著升高(P＜0.05);ADF組大鼠血清LDL、VLDL較高CR組顯著降低(P＜0.05)，TC、TG、HDL-C與CR組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　1、高脂飲食可成功建立非酒精性脂肪性肝病模型。
　　2、隔日禁食在高脂飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪性肝病中，具有一定的改善作用，其機制可能為通過提高胰島素的敏感性、調(diào)節(jié)脂代謝紊亂，而起到降脂、保肝作用。
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