塞來昔布聯(lián)合奧曲肽抑制人體胃癌生長和轉(zhuǎn)移的組織病理反應及分子靶點研究.pdf

1、胃癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，其死亡率在各種腫瘤中占第一位。目前手術仍然是胃癌的最主要治療手段，但由于大部分胃癌在確診時已處于中晚期，手術率僅約50％。為提高手術率及術后存活期，多年來各國學者對圍手術期的處理進行了不懈的探索，但目前尚無一種療效好而副反應小的理想治療方案。近年來非細胞毒性藥物的應用日益受到重視，其中尤以環(huán)氧合酶抑制劑及生長抑素類似物為研究熱點，基礎研究發(fā)現(xiàn)二者能明顯抑制胃癌的生長及轉(zhuǎn)移。 本課題首次聯(lián)合環(huán)氧合酶

2、-2抑制劑塞來昔布和生長抑素類似物奧曲肽應用于人體胃癌的術前治療，并探討該方案能否抑制人體胃癌的生長、轉(zhuǎn)移及其分子作用靶點。 方法：1.塞來昔布聯(lián)合奧曲肽抑制人胃癌生長的臨床隨機對照研究51例胃癌患者術前隨機分3組：對照組15例，術前不用藥物；塞來昔布組18例，術前口服塞來昔布，0.2g，qd，×7d；聯(lián)合組18例，術前口服塞來昔布0.2g，qd，+奧曲肽100μg，皮下注射，qd，×7d。術中切除標本送組織學研究，分析胃癌組織

3、壞死、炎細胞浸潤及纖維組織增生情況；免疫組化檢測胃癌組織的微血管密度(MVD)及胃癌細胞COX-2的表達情況，DNA末端原位標記染色法檢測胃癌細胞凋亡。實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測術前內(nèi)鏡活檢的胃癌組織生長抑素受體(SSTR)-1、2、3型的mRNA表達量。 2.塞來昔布聯(lián)合奧曲肽抑制人胃癌轉(zhuǎn)移的臨床隨機對照研究75例胃癌患者術前隨機分3組，每組25例，方案同前。用免疫組織化學方法檢測術中切除胃癌標本中的上

4、皮性鈣粘附蛋白(E-Cadherin，E-Cad)及基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinase，MMP)-2、MMP-9的表達情況，免疫蛋白印跡法(Westernblotting)定量分析胃癌組織MMP-2及MMP-9蛋白表達；每組隨機選10例患者的胃癌手術標本，用免疫磁珠分選法分離胃癌細胞，并作穿膜侵襲實驗，比較三組胃癌細胞的遷移能力。術后1年隨訪三組患者的生存率。 3.探討塞來昔布及奧曲肽的抗腫瘤的分子作

5、用靶點胃癌患者術前隨機分為3組，每組15例，方案同前。所有術前非胃癌或胃癌組織均經(jīng)電子胃鏡活檢獲得，非胃癌組織在內(nèi)鏡和病理上為慢性淺表性胃竇炎。用RT-PCR方法檢測樣本非甾體類抗炎藥(NSAIDs)活化基因-1(NSAIDs-activatedgene，NAG-1)的mRNA表達，用生物分子相互作用系統(tǒng)技術檢測2型生長抑素受體(SSTR-2)表達。 結果：1.塞來昔布聯(lián)合奧曲肽抑制人胃癌生長的臨床隨機對照研究與對照組比較，聯(lián)合

6、組胃癌組織有顯著壞死(p＜0.05)，纖維組織增生明顯(p＜0.05)，其胃癌細胞凋亡率(7.06％)高于對照組(6.23％)，p＜0.05；塞來昔布聯(lián)合奧曲肽使腫瘤組織中的MVD(20.44)較對照組(24.87)明顯減少(p＜0.05)，而各組COX-2表達無明顯差異。所有胃癌組織均有SSTR-1，SSTR-2及SSTR-3的mRNA表達。 2.塞來昔布聯(lián)合奧曲肽抑制人胃癌轉(zhuǎn)移的臨床隨機對照研究聯(lián)合組胃癌組織E-Cad異常表

7、達率(28.0％vs56.0％)、MMP-2及MMP-9量(OD值分別為：99.4±19.8vs314.4±11.4；89.0±12.6vs241.3±12.3)，均較對照組明顯降低(p＜0.05)。聯(lián)合組胃癌細胞遷移能力比對照組降低了38％，p＜0.05。在隨訪1年的35例患者中，胃癌對照組及塞來昔布組的1年存活率均為80％(分別為12/15，8/10)，而聯(lián)合用藥組為100％(10/10)。 3.探討塞來昔布及奧曲肽的抗腫瘤

8、的分子作用靶點RT-PCR結果顯示，各組均有NAG-1mRNA表達，但應用塞來昔布后(塞來昔布組及聯(lián)合組)后，能上調(diào)NAG-1的表達，與術前非胃癌及胃癌組織、術后胃癌對照組比較，p＜0.05。生物分子相互作用系統(tǒng)檢測顯示，僅8.0％術前非胃癌組織有SSTR-2表達，而胃癌組織中陽性率(36.0％)顯著提高(p＜0.01)。且術前非胃癌組織SSTR-2表達量低于胃癌組織。術后胃癌對照組SSTR-2陽性率(13.3％)顯著低于術前胃癌(p＜

9、0.05)；但陽性標本中SSTR-2表達量高于術前胃癌(p＜0.05)。單用塞來昔布或聯(lián)合治療方案后，SSTR-2表達率較胃癌對照組上調(diào)(p＜0.05)，陽性標本中SSTR-2表達量也高于僅接受胃癌手術的對照組(p＜0.05)。 結論：1.塞來昔布聯(lián)合奧曲肽能抑制人體胃癌的生長。 2.塞來昔布聯(lián)合奧曲肽可減少人體內(nèi)胃癌細胞的轉(zhuǎn)移。 3.塞來昔布既通過COX-2途徑也通過非COX-2途徑(NAG-1途徑)來發(fā)揮抗胃