垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷腦保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：觀察垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(pituitary adenylate cyclase activatingpolypeptide，PACAP)對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的腦保護(hù)作用，并對(duì)其可能的機(jī)理進(jìn)行探討，為臨床治療缺血性腦血管病(ischemic cerebrovascular disease，ICVD)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：本項(xiàng)研究采用線栓法制備大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型，設(shè)立假手術(shù)組、生理鹽水(normal s

2、aline，NS)組和PACAP低、中、高劑量組(分別用PACAP1、2、3組表示)。假手術(shù)組接受造模手術(shù)，但不插線，不給藥；NS組和PACAP1、2、3組于造模前15分鐘，借助大鼠腦立體定向儀及微量注射器由側(cè)腦室分別給予NS5ml、PACAP 10<'-11> mol、PACAP 10<'-10> mol和PACAP 10<'-9>mol，再行造模手術(shù)，缺血2h再灌注24h，測(cè)定腦梗死體積反映腦損傷程度；測(cè)定腦含水量反映腦水腫程度；測(cè)

3、定腦組織中自由基(free radical，F(xiàn)R)清除劑超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性和脂質(zhì)過(guò)氧化降解產(chǎn)物丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量，二者反映氧自由基生成的變化；測(cè)定腦組織中一氧化氮(nitrogen monoxidum，NO)含量，反映NO生成的變化；腦組織HE染色(hematoxylin and eosin stain，HE)及損傷區(qū)域存活神經(jīng)元計(jì)數(shù)，反映缺血再灌注區(qū)

4、域神經(jīng)元損傷程度。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1.腦缺血2h再灌注24h，NS組損傷側(cè)腦組織有明顯的梗死現(xiàn)象。PACAP各劑量組腦梗死體積明顯縮小，與NS組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。PACAP2組、3組與 PACAP1組相比，腦梗死體積縮小，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PACAP2組、3組腦梗死體積相比差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.腦缺血2h再灌注24h，NS組損傷側(cè)腦組織含水量明顯增加。PACAP各劑量組腦含水量明顯低于NS組，與其相比差

5、異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PACAP2組、3組與PACAP1組相比，腦含水量明顯減少，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PACAP2組、3組腦含水量相比無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 3.腦缺血2h再灌注24h，NS組腦組織SOD活性明顯下降。PACAP各劑量組能不同程度的提高SOD活性，與NS組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PACAP2組與PACAP1組相比，腦組織SOD活性明顯升高，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PACAP1組、3組之間，PACAP2組、3組之間腦組織S

6、OD活性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4 腦缺血2h再灌注24h，NS組腦組織MDA含量明顯增加。PACAP1組腦組織MDA含量與NS組相比無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。PACAP2組、3組能不同程度的降低腦組織MDA含量，與NS組相比具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，PACAP2組、3 組與PACAP1組相比，MDA含量明顯較少，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PACAP2組、3組之間腦組織MDA含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 5.腦缺血2h再灌注24h，NS組腦組織NO

7、含量明顯增加。PACAP1組腦組織NO含量與NS組相比無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。PACAP2組、3組能不同程度的降低腦組織NO含量，與NS組相比其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PACAP2組、PACAP3組與PACAP1組相比，NO含量明顯降低，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PACAP2組、3組之間腦組織NO含量差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 6.腦缺血2h再灌注5天后NS組腦組織呈缺血性改變，可見(jiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞水腫，稀釋變性，錐體細(xì)胞體積縮小，細(xì)胞核固縮深染，胞

8、漿嗜伊紅，小膠質(zhì)細(xì)胞明顯增生，形成格子細(xì)胞，炎細(xì)胞浸潤(rùn)，部分細(xì)胞壞死、消失，并可見(jiàn)呈篩狀的壞死灶，存活神經(jīng)元數(shù)目稀少。PACAP1組鏡下腦組織缺血性改變無(wú)顯著改善，其存活神經(jīng)元數(shù)目與NS組相比無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。PACAP2組、3組可見(jiàn)不同程度細(xì)胞水腫減輕，核固縮減少，存活神經(jīng)元數(shù)目較多，與NS相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。PACAP2組、3組與PACAP1組相比，存活神經(jīng)元數(shù)目明顯增多，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PACAP2組、3組存活神經(jīng)元數(shù)目相比