糙花少穗竹天然居群遺傳多樣性研究.pdf

1、本論文從表型水平和DNA水平研究了中國(guó)永安糙花少穗竹(Oligostachyumscabriflorum)天然居群遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)，并探討了居群間的相互關(guān)系和基因流。通過(guò)分析糙花少穗竹目前的遺傳資源現(xiàn)狀，提出合理的利用資源對(duì)策。研究結(jié)果如下： 1.選擇13個(gè)表型性狀，運(yùn)用變異系數(shù)、巢式方差分析和分化系數(shù)研究亞居群間和亞居群內(nèi)的表型變異。結(jié)果表明：糙花少穗竹亞居群內(nèi)的變異大于亞居群間的變異，但表型的平均分化系數(shù)VST=37.2

2、9％，亞居群間的分化還是比較大的。表型性狀與微環(huán)境因子間的相關(guān)分析表明：葉片性狀與海拔相關(guān)極顯著；株高與海拔相關(guān)顯著；各表型性狀與坡度、坡位間相關(guān)不顯著；枝下高和胸徑處節(jié)長(zhǎng)與立地類型間相關(guān)顯著；株高與喬木類型間相關(guān)顯著。通過(guò)聚類分析發(fā)現(xiàn)，青水居群內(nèi)的亞居群聚為一類，而安砂居群內(nèi)的亞居群A5聚到洪田居群內(nèi)，洪田居群內(nèi)亞居群聚為2亞類?？赡苁侨藶楦蓴_較為頻繁所致。 2.用改良的CTAB法成功地從經(jīng)干燥的糙花少穗竹葉片中提取出質(zhì)量比較

3、高的總DNA，完全滿足RAPD的要求。 3.建立了糙花少穗竹RAPD分析的技術(shù)體系。反應(yīng)終體積是20ul，Buffer1倍液，Mg2+2.0mM，Taq酶1U，引物0.5uM，dNTPs0.1mM，DNA1ng/ul，用滅菌的雙蒸水補(bǔ)齊。PCR循環(huán)程序如下：94℃預(yù)變性2min，然后94℃變性30second，38℃退火30second，72℃延伸90second，執(zhí)行38個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸7min，以4℃結(jié)束。 4

4、..利用RAPD標(biāo)記，并以亞居群為基本單位對(duì)永安3個(gè)天然居群的遺傳變異進(jìn)行了研究。18個(gè)隨機(jī)引物擴(kuò)增出187條清晰且可重復(fù)的譜帶，其中132條是多態(tài)的，分子量基本都分布在200bp到2800bp之間；物種水平的多態(tài)條帶百分率為70.6％。Shannon多樣性指數(shù)為0.4895，基因多樣性(h)為0.3021，有效等位基因數(shù)(Ne)為1.4256，等位基因平均數(shù)(A)為1.8951；Popgene32計(jì)算出的糙花少穗竹3個(gè)居群的基因分化系