EGCG抗消化道腫瘤作用及其分子機(jī)制的研究.pdf

1、上海第二醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文EGCG抗消化道腫瘤作用及其分子機(jī)制的研究姓名：許琦申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（消化系病）指導(dǎo)教師：冉志華20050401第一部分中文摘要目的：了解表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)是否誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞株MKN45凋亡，及其凋亡信號(hào)傳導(dǎo)途徑，為其臨床應(yīng)用提供進(jìn)一步的理論依據(jù)。方法：用四唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)EGCG以及caspase3抑制劑作用后MKN45細(xì)胞的生長(zhǎng)率；用AnnexinVFITCPI雙染

2、色法測(cè)定EGCG以及caspase3抑制劑作用后MKN45細(xì)胞的凋亡率；用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法檢測(cè)EGCG以及caspase一3抑制劑作用后MKN45細(xì)胞內(nèi)caspase3活性的改變；用Rhodaminel23染色檢測(cè)EGCG作用后MKN45細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位的改變情況。結(jié)果：EGCG作用后MKN45細(xì)胞發(fā)生凋亡，并且隨著EGcG作用時(shí)間的延長(zhǎng)及濃度的增加細(xì)胞的凋亡率增加。其中，80／amol／L濃度在干預(yù)12h后凋亡細(xì)胞就

3、達(dá)到(997116)％，較對(duì)照組[(I184027)％】顯著增多(PO01)；干預(yù)18h后三種濃度EGCG誘導(dǎo)的凋亡細(xì)胞百分率都較對(duì)照組顯著增加(P005)。在EGCG作用8h后MKN45細(xì)胞內(nèi)的caspase一3活性開(kāi)始升高，并于作用12h后活性明顯升高，80pmol／L濃度干預(yù)24h后caspase一3活性最高達(dá)到對(duì)照組的858倍。線粒體的膜電位于EGCG作用4h后就開(kāi)始明顯下降，并與時(shí)間和濃度正相關(guān)。在409mol／L的EGCG干

4、預(yù)4h后線粒體的膜電位就降至(8950086m，較對(duì)照組顯著降低(PO01)，12小時(shí)后80Bmol／L干預(yù)組線粒體對(duì)Rhodamine_123的吸收率幾乎降到最低(1304O66)％。用caspase3抑制劑作用后，EGCG抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的作用明顯減弱，細(xì)胞的凋亡率下降，caspase3活性也顯著下降。結(jié)論：EGCG可以誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞株MKN45細(xì)胞的凋亡，并且其所誘導(dǎo)的凋亡與EGCG的作用時(shí)間及濃度呈正相關(guān)。MKN45細(xì)胞內(nèi)caspa