板藍(lán)根注射液的毛細(xì)管電泳分析.pdf

1、毛細(xì)管電泳技術(shù)是近十幾年發(fā)展起來的一種高效分離分析技術(shù)，它具有高效、快速、進(jìn)樣體積小、溶劑消耗少、抗污染能力強(qiáng)、自動(dòng)化程度高、分離模式多樣等優(yōu)點(diǎn)，在中藥分析中顯示出很大的優(yōu)勢(shì)和潛力。板藍(lán)根注射液是臨床常用清熱解毒抗感染的中藥制劑之一，目前還缺乏統(tǒng)一的國家質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，不同廠家的產(chǎn)品，其成分和含量差異很大，為了有效地控制板藍(lán)根注射液的質(zhì)量，建立一種簡(jiǎn)便、穩(wěn)定的質(zhì)量控制方法勢(shì)在必行。 本論文致力于通過考察優(yōu)化毛細(xì)管電泳運(yùn)行條件，在用

2、毛細(xì)管區(qū)帶電泳法(CZE)來分析板藍(lán)根注射液活性成分的基礎(chǔ)上，建立一種基于配位作用的毛細(xì)管電泳法(CICE)，采用非衍生直接紫外吸收檢測(cè)，來對(duì)板藍(lán)根注射液中的主要氨基酸組分進(jìn)行定性定量分析的方法，以達(dá)到能更簡(jiǎn)便、快速地實(shí)現(xiàn)板藍(lán)根注射液中多組分的同時(shí)分離分析及定量，為建立板藍(lán)根注射液的國家質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供借鑒和參考，這也是本論文的創(chuàng)新之處。本論文的主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果為： 首先通過全面考察毛細(xì)管區(qū)帶電泳的實(shí)驗(yàn)運(yùn)行條件，在優(yōu)化條件下，

3、對(duì)板藍(lán)根注射液中多種有效成分進(jìn)行分離分析，主要采用標(biāo)準(zhǔn)品加入法來對(duì)板藍(lán)根注射液中的五種有機(jī)酸(丁香酸、水楊酸、苯甲酸、鄰氨基苯甲酸、咖啡酸)進(jìn)行了定性分析。結(jié)果顯示，這五種有機(jī)酸成分在板藍(lán)根注射液中的含量都不高，出峰很低，尤其是丁香酸、水楊酸、苯甲酸、鄰氨基苯甲酸的出峰時(shí)間都很鄰近，不易達(dá)到基線分離。所以本人認(rèn)為僅用CZE法檢測(cè)丁香酸、水楊酸、苯甲酸、鄰氨基苯甲酸不宜作為板藍(lán)根注射液質(zhì)量的控制指標(biāo)。 在上述優(yōu)化條件下，還分別對(duì)三

4、個(gè)生產(chǎn)廠家的板藍(lán)根注射液成分進(jìn)行了CZE分析，通過比較其CZE譜圖，發(fā)現(xiàn)各廠家產(chǎn)品的出峰數(shù)目、出峰時(shí)間、出峰位置、峰面積及峰高均有較大差異，說明目前臨床上使用的不同生產(chǎn)廠家的板藍(lán)根注射液組分和含量都有明顯差異，這也是目前中藥注射液所共同存在的問題。因此迫切需要建立一些更嚴(yán)格有效的分離分析方法，來對(duì)板藍(lán)根及其它中藥注射液進(jìn)行全面的成分分析、鑒別和含量的測(cè)定，這對(duì)嚴(yán)格控制產(chǎn)品質(zhì)量，制定規(guī)范統(tǒng)一的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)都有重要意義。 本論文建立

5、了一種基于配位作用的毛細(xì)管電泳手段，采用非衍生直接紫外吸收檢測(cè)，對(duì)板藍(lán)根注射液中的主要氨基酸組分進(jìn)行了分析，通過考察CICE運(yùn)行緩沖液中配位中心離子的濃度、緩沖液的酸堿度、運(yùn)行電壓、進(jìn)樣時(shí)間以及毛細(xì)管內(nèi)徑等諸多因素，以及在這種分離模式下對(duì)分離效果和檢測(cè)的影響。并在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，對(duì)板藍(lán)根注射液中的兩種游離氨基酸(精氨酸和輔氨酸)進(jìn)行定性和定量分析。本論文還通過采用紙片瓊脂擴(kuò)散法(K-B法)和試管連續(xù)稀釋法，來進(jìn)行了板藍(lán)根注射液的抗菌活