草履蚧對寄主揮發(fā)物感受的研究.pdf

1、草履蚧Drosicha corpulenta(Kuwana)屬昆蟲綱Insecta，半翅目Hemiptera，蚧總科 Coccoidea，綿蚧科 Monophlebidae，是一種危害多種林木和果樹的植食性害蟲，在我國分布廣泛。本研究以昆蟲寄主選擇機制為依據(jù)，結(jié)合觸角感受器的超微結(jié)構(gòu)與功能研究，為草履蚧的生物防治提供理論依據(jù)。研究內(nèi)容包括：（1）利用Y型嗅覺儀和蜜露顯色法，觀察寄主與非寄主植物的氣味對草履蚧行為的影響；（2）運用光學(xué)顯微

2、鏡、掃描電鏡和透射電鏡技術(shù)，研究各齡期草履蚧觸角感受器的種類、形態(tài)、數(shù)量及分布；（3）草履蚧雌成蟲觸角氣味結(jié)合蛋白（OBPs）的氨基酸序列分析。
　　結(jié)果如下：
　　1、研究了草履蚧2齡若蟲和雌成蟲分別對12種寄主植物和6種非寄主植物的趨性反應(yīng)，并采用蜜露顯色法測定了4種驅(qū)避作用較強的非寄主植物乙醇提取液對草履蚧蜜露排泄量的影響。草履蚧若蟲和雌成蟲對3種寄主植物柿樹、棗樹、楊樹的氣味均表現(xiàn)出顯著的正趨性，其中柿樹對若蟲和雌成

3、蟲的引誘率分別達(dá)到68.92％和74.68%，誘集效果達(dá)到極顯著水平；而對非寄主植物花椒、臭椿、薄荷、連翹的揮發(fā)物，以及上述4種植物的乙醇提取液表現(xiàn)出顯著的負(fù)趨性，這些植物的揮發(fā)物和提取液對草履蚧具有顯著的驅(qū)避作用，而榆葉梅植株揮發(fā)物僅對雌成蟲具有顯著驅(qū)避作用；拒食作用測定發(fā)現(xiàn)，經(jīng)臭椿和花椒乙醇提取液處理后，草履蚧若蟲的蜜露排泄量分別減少了70.57%和70.07%，雌成蟲的減少了80.53%和72.42%，減少量均達(dá)到極顯著水平。

4、r>　　2、草履蚧2齡若蟲和雌雄成蟲觸角形態(tài)及感受器的數(shù)量、分布和超微結(jié)構(gòu)特征如下：
　　草履蚧2齡若蟲和雌成蟲觸角呈短棒狀，深棕色，由柄節(jié)、梗節(jié)、鞭節(jié)組成，從2齡若蟲發(fā)育到雌成蟲鞭亞節(jié)由4個增加為6個。觸角感器共有6種類型9種形態(tài)：毛形感器（I和II）、錐形感器（I和II）、刺形感器、腔錐形感器、鐘形感器、釘形感器（I和II）。草履蚧雄蟲觸角為黑色、環(huán)生細(xì)長感覺毛呈念珠狀，由柄節(jié)、梗節(jié)和8節(jié)鞭亞節(jié)組成。雄蟲觸角感器共有7種類型1

5、0種形態(tài)：毛形感器（I、II和III）、錐形感器（I和II）、刺形感器（I和II）、腔錐形感器、鐘形感器、釘形感器和周邊具橛感器。
　　各類型感器在各齡期觸角上的形態(tài)、數(shù)量和分布不完全相同，毛形、刺形、釘型感受器的長度均隨著齡期的增加而增加，其余感器變化不大。絕大部分觸角感受器分布在觸角的背、腹面和外側(cè)面：毛形感器數(shù)量最多，在各齡期各節(jié)均有分布，約占80%；鐘形感器僅為1個，著生于梗節(jié)腹面前緣；若蟲和雌成蟲具有兩種形態(tài)的釘型感器，

6、分別分布于觸角頂節(jié)和第一、二鞭節(jié)腹面，雄成蟲僅有1種著生于觸角頂節(jié)；錐形感器雌雄成蟲比若蟲多1種；若蟲和雌成蟲的刺形感器僅有1種，主要分布于柄節(jié)和梗節(jié)，此外，雄成蟲還有1種著生在頂節(jié)；腔錐感器均為1種，主要散生于梗節(jié)和頂節(jié)上；周邊具橛感器僅存在于雄成蟲梗節(jié)前緣。
　　超微結(jié)構(gòu)表明：錐形感器表皮壁薄、壁孔多，淋巴腔內(nèi)有大量神經(jīng)樹突，是一種嗅覺感器；雄成蟲的 I型毛形感器壁較厚，壁上有孔，淋巴腔內(nèi)有2個神經(jīng)樹突，可能具有嗅覺感受功能；

7、其 II型毛形感受器壁孔較少，基部淋巴腔內(nèi)有一管狀體，行使嗅覺感受和機械感受的功能；若蟲、雌成蟲的毛形感受器 I型與雄成蟲的毛形感受器 III型、刺形感器 II型，這三種感器特點為表皮壁厚且無孔，淋巴腔內(nèi)無樹突分支，其功能與已知的典型機械感受器--周邊具橛感器、鐘形感受器一致。雌成蟲的刺形感受器與雄蟲的刺形感器 I型表皮壁無孔，內(nèi)部樹突鞘將樹突分支包被在內(nèi)淋巴腔內(nèi)，可能行使機械感受和化學(xué)感受功能；釘型感器壁較薄、壁孔較多，內(nèi)有大量神經(jīng)樹

8、突，頂部有側(cè)孔，腔錐形感受器具有頂孔，兩者具有味覺感受功能。
　　3.提取雌成蟲觸角 RNA，反轉(zhuǎn)錄獲得 cDNA，進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序分析：
　　篩選得到了17條草履蚧預(yù)測的 OBP氨基酸序列，有6個保守的半胱氨酸位點，符合昆蟲 OBP結(jié)構(gòu)特點“C1-X15-39-C2-X3-C3-X21-44-C4-X7-12-C5-X8-C6”。通過比對分析，表明其中14條預(yù)測序列屬于 OBPs家族。比對結(jié)果表明，草履蚧與同一亞目的蚜科昆蟲