雌馬酚對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖的抑制作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察雌馬酚對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖的抑制作用，并探討其分子機(jī)制。
　　方法：用不同濃度雌馬酚(10-7mol/L、5×10-7mol/L、10-6mol/L、5×10-6mol/L、10-5mol/L)和雌二醇(10-9mol/L)分別處理人乳腺癌細(xì)胞MCF-7和人正常乳腺細(xì)胞MCF-10A，并用顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化、MTT法測(cè)定細(xì)胞數(shù)量和增殖率、流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞凋亡率和周期、體外劃痕實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞遷移能力、蛋白質(zhì)免疫

2、印跡技術(shù)檢測(cè)（bag-1、bcl-2、VEGF、ERK1/2、磷酸化ERK1/2、p38、磷酸化p38）蛋白的表達(dá)水平，從分子水平上了解雌馬酚對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖的抑制作用及其分子機(jī)制。
　　結(jié)果：雌二醇可以促進(jìn)MCF-7細(xì)胞增殖，MCF-7細(xì)胞增殖率和細(xì)胞數(shù)量隨著雌馬酚濃度的升高和作用時(shí)間增加而下降。雌馬酚對(duì)MCF-10A細(xì)胞無明顯影響。與對(duì)照組相比，雌馬酚組MCF-7細(xì)胞凋亡率明顯增加，并將細(xì)胞周期阻滯于G0G1期。細(xì)胞遷移能

3、力隨雌馬酚濃度升高而降低。雌二醇可以上調(diào)抗凋亡蛋白bag-1、bcl-2以及細(xì)胞生長(zhǎng)因子VEGF蛋白表達(dá)量，隨著濃度不斷升高，雌馬酚對(duì)bag-1、bcl-2、VEGF蛋白表達(dá)的抑制作用越發(fā)明顯，當(dāng)雌馬酚濃度達(dá)到10-5mol/L時(shí)，bag-1、bcl-2、VEGF蛋白的表達(dá)量與對(duì)照組相比最低。雌二醇對(duì)總ERK1/2和總p38的表達(dá)無影響，可上調(diào)p-ERK1/2和p-p38蛋白表達(dá)量;雌馬酚對(duì)總ERK1/2和總p38蛋白表達(dá)無影響;隨著雌