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文檔簡介
1、目的:建立D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠模型,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測氯通道蛋白-3(chloride channel protein-3,CLC-3)和水通道蛋白-1(aquaporin-1,AQP-1)在D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠晶狀體和正常大鼠晶狀體中含量的變化,探討CLC-3和AQP-1與白內(nèi)障發(fā)病的關(guān)系,為白內(nèi)障病因?qū)W研究提供新的理論基礎(chǔ)。 實(shí)驗(yàn)方法:(1)建立 D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠動(dòng)物模型。(2)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方
2、法檢測CLC-3mRNA和AQP-1mRNA在D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠晶狀體中含量的變化。 結(jié)果:(1)成功建立 D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠動(dòng)物模型,并進(jìn)行相應(yīng)分期分組。(2)實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測CLC-3mRNA結(jié)果:1)空白組、生理鹽水對(duì)照組和半乳糖組晶狀體中都有CLC-3mRNA的表達(dá),生理鹽水對(duì)照組大鼠在球后注射期間晶狀體內(nèi)CLC-3mRNA的表達(dá)含量無明顯變化。2)第一次給藥后的第3、7和14天時(shí),實(shí)驗(yàn)組晶狀體中CLC
3、-3mRNA的表達(dá)含量逐漸增高,且均高于同期的對(duì)照組,第14天時(shí)達(dá)最高峰,14天后又開始下降,至21天時(shí)實(shí)驗(yàn)組CLC-3mRNA已低于同期對(duì)照組晶狀體中CLC-3mRNA表達(dá)的含量。3)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期晶狀體中CLC-3mRNA的表達(dá)均高于透明晶狀體,且三期晶狀體中CLC-3mRNA的含量呈逐漸增多趨勢,Ⅲ期晶狀體中CLC-3mRNA的含量最高,Ⅳ期和Ⅴ期時(shí)其含量又低于正常晶狀體水平。(3)實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測AQP-1mRNA結(jié)果:
4、1)空白組、生理鹽水對(duì)照組和半乳糖組晶狀體中都有AQP-1mRNA的表達(dá),生理鹽水對(duì)照組大鼠在球后注射期間晶狀體內(nèi)AQP-1mRNA的表達(dá)含量有下降趨勢,但差異無顯著性。2)第一次給藥后的第3天開始,半乳糖組晶狀體中AQP-1mRNA的表達(dá)含量即開始下降,到30天時(shí)已降至極低水平。且均低于同期的對(duì)照組晶狀體中AQP-1mRNA表達(dá)的含量。3)Ⅰ期晶狀體AQP-1mRNA的含量已開始下降,隨著白內(nèi)障的發(fā)展,進(jìn)一步呈下降趨勢,到Ⅴ期時(shí)降至極
5、低水平。 結(jié)論:1)CLC-3mRNA在早期D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠晶狀體中表達(dá)增加,提示CLC-3可能在白內(nèi)障的早期形成過程中發(fā)揮作用。2)CLC-3mRNA 在晶狀體囊泡初期時(shí)表達(dá)已開始增加,皮質(zhì)性白內(nèi)障時(shí)期時(shí)表達(dá)最多,而隨著白內(nèi)障的進(jìn)一步發(fā)展,含量又開始下降。提示CLC-3可能參與了白內(nèi)障的發(fā)生發(fā)展,尤其是皮質(zhì)性白內(nèi)障,為白內(nèi)障的形成機(jī)制提供一個(gè)新的理論基礎(chǔ)。3)AQP-1mRNA在早期D-半乳糖性白內(nèi)障大鼠晶狀體中表達(dá)即降
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