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文檔簡介
1、目的:觀察豚鼠耳蝸局部心鈉素(ANP)和一氧化氮合酶(NOS)免疫組化反應產(chǎn)物的分布,為研究ANP 和NOS 在豚鼠耳蝸局部血流、淋巴以及神經(jīng)調節(jié)中的相互作用提供形態(tài)學依據(jù);初步研究ANP 和一氧化氮(NO)在豚鼠耳蝸血流(CoBF)調節(jié)中的相互關系。 方法: (1)采用免疫組織化學雙標法檢測ANP 和NOS 在正常豚鼠耳蝸的分布特征。 (2)采用免疫熒光化學雙標方法檢測ANP 和NOS 在豚鼠耳蝸的分布,觀察A
2、NP 和NOS 在同一細胞內(nèi)的定位特征。 (3)將豚鼠隨機分為:ANP+左旋精氨酸(L-Arg)組、ANP+生理鹽水組、N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)+ANP 組、L-NAME+ANP +L-Arg 組及L-NAME+生理鹽水組。經(jīng)腹側打開聽泡,耳蝸底轉鼓階開窗分別給予各組藥物,實驗過程中采用激光多普勒血流量儀監(jiān)測耳蝸血流量。 結果: (1)免疫組化雙標結果顯示:在耳蝸各轉螺旋動脈、血管紋、螺旋緣、螺旋
3、韌帶和Corti 器顯示雙陽性染色;耳蝸神經(jīng)節(jié)細胞及囊斑神經(jīng)細胞壁及軸突NOS 陽性染色,胞質ANP 陽性染色;蓋膜、前庭膜陰性染色。 (2)免疫熒光雙標結果顯示:蝸軸螺旋動脈和血管紋均發(fā)現(xiàn)ANP 和NOS 雙陽性表達;螺旋緣、螺旋韌帶、Corti 器、耳蝸神經(jīng)節(jié)細胞ANP 和NOS 雙陽性表達,其中部分耳蝸神經(jīng)節(jié)細胞呈ANP 陽性表達。 (3)局部給予ANP 可引起CoBF 顯著升高,加用L-Arg 會引起血流的進一步
4、升高。L-NAME 可引起CoBF下降,給予ANP 后CoBF 迅速回升。ANP 所引起的血流變化在使用L-Arg之后仍會進一步升高。對照組耳蝸血流可見微弱回升。 結論:由ANP 和NOS 在內(nèi)耳的定位特點可以推斷,二者在耳蝸局部血流調節(jié),內(nèi)、外淋巴平衡調節(jié)以及神經(jīng)信號傳遞等方面可能具有重要作用,二者之間可能存在密切的相互作用機制。ANP 和L-Arg 單獨和聯(lián)合作用可不同程度地增加耳蝸血流量,證明NO 和ANP 在CoBF 自
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