一氧化氮對(duì)小鼠胚胎體外發(fā)育的影響.pdf

1、胚胎培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物體外胚胎生產(chǎn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一,是生物技術(shù)的一個(gè)核心部分。近年來,胚胎培養(yǎng)技術(shù)雖然已得到很大程度的提高,但是還存在在生產(chǎn)效率低下、培養(yǎng)體系不穩(wěn)定、胚胎質(zhì)量不高等問題。NO作為一種自由基性質(zhì)的生物信使,在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮多種效應(yīng),在早期胚胎發(fā)育過程中具有調(diào)節(jié)作用,但目前關(guān)于NO影響早期胚胎發(fā)育的研究報(bào)道較少。本試驗(yàn)利用昆明小鼠作為試驗(yàn)材料,在小鼠體外受精液和胚胎培養(yǎng)液分別添加不同濃度的SNP,添加SNP的濃度分別為0 mmol/

2、L、1 mmol/L、0.1 mmol/L、0.01 mmol/L和0.001 mmol/L。探討不同濃度SNP對(duì)小鼠體外受精、受精后胚胎及體內(nèi)胚體外發(fā)育卵裂率、囊胚率、4-細(xì)胞率、囊胚總細(xì)胞數(shù)等指標(biāo)的影響。 結(jié)果表明：①體內(nèi)胚體外培養(yǎng)時(shí),0.01 mmol/L SNP組、0.001 mmol/L SNP組和0 mmol/L SNP組對(duì)小鼠胚胎卵裂率沒有差異(P>0.05);但是4-細(xì)胞率0.01mmol/L SNP組顯著高于0

3、.001 mmol/L SNP組和0 mmol/L SNP組(P<0.05),0.001mmol/L SNP組與0 mmol/L SNP組之間沒有差異(P>0.05);囊胚率0.01 mmol/LSNP組、0.001 mmol/L SNP組和0 mmol/L SNP組之間沒有差異(P>0.05);就囊胚總細(xì)胞數(shù)而言,0.001 mmol/L SNP組顯著高于0.01 mmol/L SNP組和0 mmol/LSNP組(P<0.05);就是

4、在卵裂率、4-細(xì)胞率、囊胚率和囊胚總細(xì)胞數(shù)等方面,0.01 mmol/L SNP組、0.001 mmol/L SNP組和0 mmol/L SNP組均極顯著高于0.1mmol/L SNP組和1.0 mmol/L SNP組(P<0.01),0.1 mmol/L SNP組與1.0 mmol/LSNP組之間也存在顯著差異(P<0.05)。②小鼠體內(nèi)胚體外培養(yǎng)4-細(xì)胞前添加SNP時(shí),0.001 mmol/L SNP組與0 mmol/L SNP組和

5、0.01 mmol/L SNP組之間囊胚率沒有顯著差異(P>0.05),但0.01 mmol/L SNP組囊胚率顯著高于0 mmol/L SNP組(P<0.05),0.01 mmol/L SNP組、0.001 mmol/L SNP組和0 mmol/L SNP組囊胚率均極顯著高于0.1 mmol/L SNP組和1.0 mmol/L SNP組(P<0.01)。③體外受精時(shí),0.001 mmol/L SNP組卵裂率顯著高于0 mmol/L S

6、NP組和0.01 mmol/L SNP組(P<0.05),0.01 mmol/L SNP組與0 mmol/L SNP組之間卵裂率沒有顯著差異(P>0.05);0 mmol/L SNP組、0.01 mmol/L SNP組、0.001 mmol/L SNP組之間囊胚率沒有顯著差異(P>0.05);對(duì)胚胎進(jìn)行囊胚總細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)發(fā)現(xiàn),在小鼠受精液中添加0.001 mmol/L SNP的胚胎總細(xì)胞數(shù)顯著高于0 mmol/L SNP組和0.01 mm

7、ol/L SNP組(P<05),但0.01 mmol/L SNP組與0 mmol/L SNP組之間沒有顯著差異(P>0.05)：0.01 mmol/L SNP組、0.001 mmol/L SNP組和0 mmol/L SNP組卵裂率和囊胚率均極顯著高于0 mmol/L SNP組和1.0 mmol/L SNP組(P<0.01),0.1 mmol/L SNP組極顯著高于1.0 mmol/L SNP組(P<0.01)。④體外受精胚培養(yǎng)時(shí),0.0

8、1 mmol/L SNP組的4-細(xì)胞率顯著高于0 mmol/L SNP組和0.001 mmol/L SNP組(P<0.05),0 mmol/L SNP組與0.001 mmol/L SNP組之間沒有差異(P>0.05)。三組均極顯著高于0.1 mmol/L SNP組和1.0 mmol/L SNP組(P<0.01)。0.1 mmol/L SNP組極顯著高于1.0 mmol/L SNP組(P<0.01);囊胚率0 mmol/L SNP組、0.

9、01 mmol/L SNP組和0.001 mmol/L SNP組之間沒有差異(P>0.05),三組均極顯著高于0.1 mmol/L SNP組和1.0 mmol/L SNP組(P<0.01),0.1 mmol/L SNP組與1.0 mmol/L SNP組相比,囊胚率極顯著高于1.0 mmol/L SNP組(P<0.01)。⑤不同濃度SNP影響小鼠胚胎發(fā)育質(zhì)量,0.1 mmol/L SNP組和1.0mmol/L SNP組胚胎碎裂及發(fā)育阻滯現(xiàn)