2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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文檔簡介

1、本文以基因克隆、表達和淋巴細胞雜交瘤技術為基礎,制備并鑒定了針對秦川黃牛成熟朊蛋白mPrP的單抗,以期用于瘋牛病的免疫診斷研究. 在秦川黃牛、甘肅土種綿羊和漢族人朊蛋白PrP和疊朊Dpl編碼基因0RF的基礎上,進一步構建出含成熟蛋白編碼基因的重組表達質粒,經IPTG誘導實現(xiàn)了3個mPrP和13個mDpl的E.coli中的高效表達.以SAF-70單抗為檢測抗體的Western Blot分析表明3個重組mPrP不僅具有強的反應原性而且能夠在

2、細胞內形成二聚體.蛋白酶K消化結果農明重組mPrP不具有朊病毒PrP<'Sc>的蛋白酶K抗性. 以純化復性的黃牛mPrP免疫Balb/C鼠,加強免疫3天后取脾細胞與SP2/0細胞融合,間接ELISA法篩選陽性細胞株,并進一步鑒定和層析法純化的腹水抗體.結果表明獲得了7個能穩(wěn)定分泌抗黃牛mPrP的細胞株,除N17抗體屬于IgG2b外,其余均屬于IgG2a.7個單抗腹水效價介于1×10<'4>-1×10<'4>之間,親和常數介于10

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