GSM 1800 MHz射頻電磁場候選反應(yīng)基因分析.pdf

1、本學(xué)位論文的研究目的是進(jìn)一步采用熒光實時定量PCR技術(shù)檢驗這些RFEMF候選反應(yīng)基因，以分析和判斷RFEMF對這些基因表達(dá)的影響。研究內(nèi)容分為兩部分： 第一部分：1800MHzRFEMF對人乳腺癌細(xì)胞MCF-7基因表達(dá)譜的影響。 為研究GSM1800MHzRFEMF對人乳腺癌細(xì)胞MCF-7基因表達(dá)譜的影響，本實驗室已完成了前期工作：將體外傳代培養(yǎng)的MCF-7細(xì)胞隨機(jī)分為2組，并接受比吸收率為3.5W/kg的GSM1800

2、MHzRFEMF間斷輻照(5min開/10min關(guān))和假輻照24h，利用Affymetrix公司基因芯片U133A進(jìn)行基因轉(zhuǎn)錄組水平分析。芯片實驗數(shù)據(jù)采用MAS5.0軟件和DMT3.0軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果表明：MCF-7細(xì)胞受比吸收率為3.5W/kg的RFEMF輻照后，僅找到5個100％一致變化的候選差異基因。本研究論文用熒光實時定量RT-PCR實驗進(jìn)一步檢驗基因芯片篩選到的差異表達(dá)基因，以GAPDH為內(nèi)參基因，暴露組與對照組間

3、差異基因表達(dá)水平的變化倍數(shù)由2-ΔΔCt表示。通過6次重復(fù)實驗，發(fā)現(xiàn)各批次細(xì)胞間基因的表達(dá)情況有一定變化，但總體平均值接近1.00，且暴露組與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，說明熒光實時定量RT-PCR實驗未能驗證基因芯片篩到的候選差異表達(dá)基因。 研究結(jié)論：在本實驗條件下，未能檢測到GSM1800MHzRFEMF對MCF-7細(xì)胞基因表達(dá)的明顯影響。 第二部分：1800MHzRFEMF對酵母細(xì)胞基因表達(dá)譜的

4、影響 為研究GSM1800MHzRFEMF對釀酒酵母細(xì)胞基因表達(dá)譜的影響，篩選模式生物可能的RFEMF反應(yīng)基因，以指導(dǎo)RFEMF的健康危險度評估相關(guān)研究，實驗室已完成了前期工作：將靜止培養(yǎng)的釀酒酵母細(xì)胞分別接受比吸收率為3.5W/kg的1800MHzRFEMF間斷輻照(5min開/10min關(guān))和假輻照6小時，并用Affymetrix公司的釀酒酵母基因組芯片(YeastGenomeS98)進(jìn)行全基因轉(zhuǎn)錄組水平分析。芯片實驗數(shù)據(jù)采

5、用Affymetrix公司的GCOS1.0和DMT3.0軟件進(jìn)行分析，篩選到40個100％一致變化的差異基因，其中27個基因上調(diào)，13個基因下調(diào)。采用熒光實時定量RT-PCR實驗進(jìn)一步檢驗基因芯片分析篩選到的其中24個表達(dá)上調(diào)基因，以PDA，ACT1為內(nèi)參，暴露組與對照組間差異基因表達(dá)水平的變化倍數(shù)由2-ΔΔCt表示。通過3次重復(fù)實驗，各批次細(xì)胞間基因的表達(dá)情況有一定變化，但總體平均值接近1.00，且暴露組與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意