人冠部牙本質(zhì)中基質(zhì)金屬蛋白酶8的免疫組化定位.pdf

1、目的：
　　 通過對(duì)人冠部脫礦牙本質(zhì)切片的免疫組化染色觀察，了解基質(zhì)金屬蛋白酶8在牙本質(zhì)中的存在情況，進(jìn)一步探討基質(zhì)金屬蛋白酶8在牙本質(zhì)中的分布規(guī)律，以期為后續(xù)研究提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。本課題是關(guān)于基質(zhì)金屬蛋白酶8對(duì)樹脂粘接影響序列課題中的前期研究。
　　 材料和方法：收集在中山大學(xué)附屬口腔醫(yī)院口腔頜面外科門診因治療需要拔除的前磨牙和第三磨牙，共計(jì)39顆。按性別、位置和年齡分組。拔除后立即在冰浴下去除牙根、牙髓以及牙齦

2、。置于4％的福爾馬林溶液中固定72小時(shí)。固定后在水冷卻下以低速金剛砂裂鉆取牙冠近遠(yuǎn)中向或頰舌向中1/3厚1.5mm的牙體組織，浸泡于10％EDTA中脫礦5周，石蠟包埋，切片，以兔抗人基質(zhì)金屬蛋白酶8多克隆抗體進(jìn)行免疫組化染色。光鏡下觀察標(biāo)本的成牙本質(zhì)細(xì)胞層、前期牙本質(zhì)層、成熟牙本質(zhì)深中淺層和鄰近釉牙本質(zhì)界5μm的牙本質(zhì)6個(gè)區(qū)域。拍攝圖片，Imageproplus6.0軟件對(duì)各區(qū)域的平均光密度值進(jìn)行測(cè)量。
　　 結(jié)果：
　　

3、 人冠部牙本質(zhì)全層中均可見基質(zhì)金屬蛋白酶8的免疫染色。
　　 在免疫染色強(qiáng)度上，成牙本質(zhì)細(xì)胞層染色最強(qiáng)，前期牙本質(zhì)層、鄰近釉牙本質(zhì)界5μm區(qū)、牙本質(zhì)深層、牙本質(zhì)中層和牙本質(zhì)淺層依次降低。各層的平均光密度值依次為0.186±0.054/pix2、0.143±0.069/pix2、0.092±0.048pix2、0.032±0.025/pix2、0.021±0.019/pix2和0.020±0.018/pix2。
　　 成

4、牙本質(zhì)細(xì)胞層中染色主要位于細(xì)胞內(nèi)；前期牙本質(zhì)層中染色位于牙本質(zhì)小管和管周牙本質(zhì)；牙本質(zhì)深層主要分布于管間牙本質(zhì)，在靠近前期牙本質(zhì)約100μm的區(qū)域內(nèi)牙本質(zhì)小管也有染色；牙本質(zhì)中層和淺層染色位于管周牙本質(zhì)，牙本質(zhì)小管內(nèi)幾乎沒有染色。釉牙本質(zhì)界區(qū)有沿釉牙本質(zhì)界分布的免疫染色線。
　　 結(jié)論：
　　 基質(zhì)金屬蛋白酶8存在于人冠部牙本質(zhì)全層中。前期牙本質(zhì)含量最高，鄰近釉牙本質(zhì)界5μm區(qū)、牙本質(zhì)深層、牙本質(zhì)中層和牙本質(zhì)淺層依次降低