初治與復(fù)發(fā)卵巢上皮性癌組織中BCRP、P-gp、LRP和Akt的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的：本課題對(duì)上皮性卵巢癌(卵巢癌)同一位患者初治與復(fù)發(fā)時(shí)手術(shù)切除組織標(biāo)本中BCRP、P-gp、LRP和Akt的表達(dá)狀況進(jìn)行免疫組化分析，結(jié)合臨床資料，旨在從腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物和耐藥蛋白的表達(dá)角度揭示卵巢癌多藥耐藥現(xiàn)象，為卵巢癌可預(yù)見(jiàn)性選擇有效化療藥物和判斷化療效果提供有價(jià)值的標(biāo)志物。進(jìn)一步加深對(duì)卵巢癌復(fù)發(fā)耐藥機(jī)制的理解，并為卵巢癌的治療提供新思路。 方法： 1.研究對(duì)象本研究收集2002年01月至2008年01月河北醫(yī)科

2、大學(xué)第四醫(yī)院婦科收治的復(fù)發(fā)卵巢癌患者30例，并符合以下條件：①初次手術(shù)前未經(jīng)化療；②組織學(xué)確診；③初次手術(shù)后均給予以鉑類(lèi)為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療(PC方案：順鉑75mg/m2，環(huán)磷酰胺600mg/m2)6療程以上；④復(fù)發(fā)后均給予第二次手術(shù)，取得同一位患者兩次手術(shù)的癌組織標(biāo)本。根據(jù)WHO細(xì)胞分化標(biāo)準(zhǔn)，初次術(shù)后，中分化19例，低分化11例；第二次手術(shù)后，中分化11例，低分化19例。 2.實(shí)驗(yàn)方法標(biāo)本取得后，用組織切片機(jī)作4um厚連續(xù)切片。玻

3、片經(jīng)左旋多聚賴(lài)氨酸(PLL)處理后制組織切片。標(biāo)本進(jìn)行BCRP、P-gp、LRP、Akt免疫組化染色。隨機(jī)選擇高倍鏡(×40)10個(gè)視野，計(jì)數(shù)腫瘤細(xì)胞總數(shù)和陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù)，得出陽(yáng)性細(xì)胞百分率。 3.統(tǒng)計(jì)分析：應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，兩組陽(yáng)性率差別的假設(shè)檢驗(yàn)用X2檢驗(yàn)和Fisher確切概率計(jì)算法，Spearman等級(jí)相關(guān)分析二者的相關(guān)性，顯著水平為雙側(cè)α=0.05。 結(jié)果： 1.BCRP、P-gp、LRP和A

4、kt在復(fù)發(fā)卵巢癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率均明顯高于初治癌組織皆有顯著性差異；BCRP在復(fù)發(fā)癌組織中的過(guò)表達(dá)率高于初治癌組織，有顯著性差異。而復(fù)發(fā)卵巢癌組織中P-gp、LRP、和Akt的過(guò)表達(dá)率與初治癌組織相比，差別無(wú)顯著性。 2.在30例復(fù)發(fā)卵巢癌患者中，初治癌組織中低分化者11例，復(fù)發(fā)癌組織中低分化者19例，8名患者由初治時(shí)的中分化轉(zhuǎn)為復(fù)發(fā)時(shí)的低分化，轉(zhuǎn)化率為42.1％(8/19)，復(fù)發(fā)癌組織中低分化者所占比例較初治癌組織低分化者所

5、占比例增高，有顯著性差異。 3.在復(fù)發(fā)卵巢癌組織中BCRP低分化癌與中分化癌陽(yáng)性表達(dá)率、過(guò)表達(dá)率相比，低分化癌陽(yáng)性表達(dá)率、過(guò)表達(dá)率高于中分化癌，皆有顯著性差異。而在復(fù)發(fā)卵巢癌組織中P-gp、LRP、和Akt低分化癌與中分化癌陽(yáng)性表達(dá)率、過(guò)表達(dá)率相比，差別均無(wú)顯著性。 4.在復(fù)發(fā)卵巢癌組織中BCRP、P-gp、LRP和Akt陰性表達(dá)組患者化療有效率均高于陽(yáng)性表達(dá)組。 5.在復(fù)發(fā)卵巢癌組織中BCRP與P-gp、LRP

6、、Akt的表達(dá)均呈正相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論： 1.BCRP在獲得性耐藥方面可能發(fā)揮更大作用，BCRP的過(guò)度表達(dá)與卵巢癌復(fù)發(fā)明顯相關(guān)。P-gp、LRP、和Akt在介導(dǎo)化療藥物誘導(dǎo)的獲得性耐藥方面可能發(fā)揮作用。 2.對(duì)臨床資料進(jìn)行分析提示卵巢癌復(fù)發(fā)與組織分化降低有顯著相關(guān)性。 3.BCRP的表達(dá)與患者病理分級(jí)有關(guān)，而P-gp、LRP、和Akt與患者病理分級(jí)無(wú)關(guān)，表明BCRP與維持細(xì)胞處于未分化或低分化原始狀態(tài)有關(guān)；

7、腫瘤干細(xì)胞高表達(dá)BCRP，推測(cè)BCRP也可用以控制干細(xì)胞的分化，因此推測(cè)，BCRP可以將化療藥物、分化相關(guān)因子泵出細(xì)胞，導(dǎo)致腫瘤化療后少數(shù)處于未分化或低分化狀態(tài)的腫瘤干細(xì)胞仍然存活，從而導(dǎo)致腫瘤耐藥、復(fù)發(fā)。 4.BCRP、P-gp、LRP和Akt耐藥基因的表達(dá)增強(qiáng)與腫瘤細(xì)胞對(duì)化療反應(yīng)差相關(guān)，能較好地判斷化療療效，而且這四個(gè)指標(biāo)的表達(dá)對(duì)耐藥的預(yù)測(cè)值也較高。 5.在復(fù)發(fā)卵巢癌組織中BCRP與P-gp、LRP、Akt的表達(dá)均呈