基于家系和病例—對(duì)照的脂聯(lián)素基因與多囊卵巢綜合征的相關(guān)性研究.pdf

1、第一部分：多囊卵巢綜合征患者血清脂聯(lián)素的測(cè)定及其相關(guān)研究
　　目的：
　　檢測(cè)多囊卵巢綜合征(PCOS)患者血清脂聯(lián)素（ADPN）水平，探討ADPN與生殖內(nèi)分泌激素、體重指數(shù)(BMI)及生化代謝指標(biāo)的相關(guān)性。
　　方法：
　　選取63例PCOS患者及40例對(duì)照作為研究對(duì)象，并分別將PCOS組和對(duì)照組按照BMI分為肥胖組和非肥胖組。測(cè)量研究對(duì)象的身高、體重，并計(jì)算BMI，于月經(jīng)周期第2～5天空腹12小時(shí)測(cè)量卵泡刺激

2、素(FSH)、黃體生成素(LH)、睪酮(T)、泌乳素(PRL)和雌二醇(E2)，空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)、甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和ADPN水平。
　　結(jié)果：
　　1、兩PCOS組的LH、T、FINS和BMI均顯著高于對(duì)照組，而FSH和ADPN顯著低于對(duì)照組，且肥胖PCOS組的ADPN低于非肥胖PCOS組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。兩PCOS

3、組的TC、LDL和HDL與非肥胖對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，而與肥胖對(duì)照組相比無明顯差異(P＞0.05)。四組之間的年齡、身高、PRL、E2、FBG和TG均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。2、相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，PCOS患者的血清ADPN與FINS、LH和T均呈負(fù)相關(guān)，與FSH、HDL呈正相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1、PCOS患者的LH、T和FINS顯著升高，而ADPN水平顯著降低，并以PCOS肥胖者降低更明顯。2、AD

4、PN與PCOS患者的FINS、LH和T密切相關(guān)，它將有可能作為一種預(yù)測(cè)指標(biāo)，預(yù)測(cè)PCOS患者將來發(fā)生2型糖尿病(T2DM)等遠(yuǎn)期并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)。
　　第二部分：脂聯(lián)素基因與多囊卵巢綜合征的病例-對(duì)照研究
　　目的：
　　通過對(duì)PCOS患者脂聯(lián)素基因（ADIPOQ）三個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)的研究，探討ADIPOQ多態(tài)性在PCOS患者發(fā)病中的作用，以期能為PCOS的病因探索和合理治療提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　采集20

5、7名PCOS患者和204名對(duì)照的外周血，提取基因組DNA，采用PCR擴(kuò)增技術(shù)和直接測(cè)序方法對(duì)ADIPOQ的3個(gè)單核苷酸多態(tài)(SNP)位點(diǎn)（rs2241766、rs1501299和rs12495941）進(jìn)行基因型分析。
　　結(jié)果：
　　(1)三個(gè)多態(tài)位點(diǎn)的基因型頻率比較:Rs2241766的三種基因型(TT/TG/GG)的頻率在PCOS組分別為51.21％，40.58％和8.21％，對(duì)照組分別為51.47％，38.73％和9.

6、8％。Rs1501299的三種基因型(CC/AC/AA)的頻率在PCOS組分別為57.49％，37.68％和4.83％，對(duì)照組分別為47.55％，41.18％和11.27％。PCOS組rs12495941的三種基因型（GG/GT/TT）的頻率分別為36.04％，49.75％和14.21％，而對(duì)照組分別為38.54％，44.79％和16.67％。由此可以看出PCOS組多態(tài)位點(diǎn)rs1501299的AA基因型頻率低于對(duì)照組(P＜0.05)，而

7、rs12495941及rs2241766的基因型頻率無明顯差異。(2)三個(gè)多態(tài)位點(diǎn)的等位基因頻率的比較:PCOS組rs2241766的等位基因(T，G)頻率分別為71.5％和28.5％，對(duì)照組分別為70.83％和29.17％，而rs1501299的等位基因(C，A)頻率在PCOS組分別為76.33％和23.67％，對(duì)照組分別為68.14％和31.86％，PCOS組rs12495941的等位基因(G，T)頻率分別為60.91％和39.09

8、％，而對(duì)照組分別為60.94％和39.06％。由上可以看出PCOS組rsl501299等位基因C的頻率高于對(duì)照組(P＜0.05)，而rs12495941及rs2241766的等位基因頻率無明顯差異。(3)進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)rs1501299的AC和CC基因型與AA基因型相比發(fā)生PCOS的風(fēng)險(xiǎn)明顯升高(P=0.013)，并且校正BMI、年齡和T等影響因素后，這種差異仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.031，OR=3.273,95％CI=1.112-9.

9、634)。
　　結(jié)論：
　　ADIPOQ的rs2241766和rs12495941的基因型分布及等位基因頻率比較對(duì)照組與PCOS組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但rs1501299的基因型分布及等位基因頻率PCOS組與對(duì)照組相比有顯著性差異。其CC基因型發(fā)生PCOS的風(fēng)險(xiǎn)明顯高于AA基因型。脂聯(lián)素基因rs1501299可能是PCOS的易感基因之一。
　　第三部分：脂聯(lián)素基因與多囊卵巢綜合征相關(guān)性的家系研究
　　目的：
　　

10、研究多囊卵巢綜合征(polycysticovarysyndrome，PCOS)家系脂聯(lián)素基因（ADIPOQ）的三種單核苷酸多態(tài)(SNP)位點(diǎn)rs1501299、rs2241766及rs12495941與PCOS發(fā)病的相關(guān)性。
　　方法：
　　選取224個(gè)PCOS核心家系，所有家系成員均空腹測(cè)定T、FBG、FINS、TG、TC、HDL和LDL等指標(biāo)，并采血提取DNA。測(cè)量家系成員的身高、體重、腰圍(WC)、臀圍(HC)，計(jì)算B

11、MI和腰臀比(WHR)。根據(jù)PCOS患者的BMI，將家系成員分為六組:組A為BMI＜25kg/m2的PCOS患者，組B為BMI≥25kg/m2的PCOS患者，組C為BMI＜25kg/m2的PCOS患者的父親，組D為BMI≥25kg/m2的PCOS患者的父親，組E為BMI＜25kg/m2的PCOS患者的母親，組F為BMI≥25kg/m2的PCOS患者的母親。采用PCR技術(shù)和直接測(cè)序方法對(duì)ADIPOQ的3個(gè)多態(tài)位點(diǎn)(rs2241766，rs

12、1501299和rs12495941)的基因型進(jìn)行分析，應(yīng)用傳遞不平衡檢驗(yàn)(TDT)來分析ADIPOQ的SNPs與PCOS的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　(1)PCOS核心家系中3個(gè)多態(tài)位點(diǎn)的等位基因和基因型分布均符合哈迪一溫伯格平衡(P＞0.05);(2)傳遞不平衡檢驗(yàn)顯示rs1501299存在傳遞不平衡現(xiàn)象(x2=7.093，P=0.0077)，C等位基因在患病子代中的傳遞過多。而多態(tài)位點(diǎn)rs2241766及rs124959

13、41中，由雜合子父母?jìng)鬟f給患病子代的等位基因頻率比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(x2=1.62，P=0.2031，x2=0.713，P=0.3985)，但均存在過度傳遞現(xiàn)象。(3)連鎖不平衡檢驗(yàn)結(jié)果顯示rs1501299和rs2241766之間存在微弱的連鎖不平衡(r2=0.063，D'=0.621);(4)將PCOS患者按照BMI分組后，肥胖PCOS患者的WC、HC、WHR、T、HDL、TG、FINS與非肥胖PCOS患者相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。肥胖PC

14、OS患者父母的WC及HC均大于非肥胖PCOS患者的父母，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且肥胖PCOS患者父親的TC明顯高于非肥胖PCOS患者的父親(P=0.025)，而其母親的FINS明顯高于非肥胖PCOS患者的母親(P=0.034)。肥胖PCOS患者及其父親、母親與非肥胖PCOS患者及其父親、母親ADIPOQ的三個(gè)多態(tài)位點(diǎn)的各基因型頻率比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論：
　　Rs1501299位點(diǎn)多態(tài)性與PCOS的發(fā)病易感性相關(guān)，C等位