番石榴多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定及生物活性測(cè)試.pdf

1、本論文以新鮮的番石榴（Psidium guajava Linn）果實(shí)為原料，對(duì)其多糖組分的提取、分離、純化、結(jié)構(gòu)鑒定進(jìn)行了較系統(tǒng)的研究并對(duì)其生物活性進(jìn)行測(cè)試。新鮮番石榴果實(shí)經(jīng)熱水提取，分級(jí)醇沉，殘?jiān)ㄟ^(guò)稀堿提取醇沉，得到四個(gè)部位的粗多糖。各部位粗多糖經(jīng)過(guò)脫蛋白，透析，凍干。苯酚-硫酸法測(cè)得水提/堿提脫蛋白多糖P50、P70、P90和AP的含量分別為：62.7％，70.3%，31.6%，21.6%。以上粗多糖經(jīng)DEAE-Cellulose

2、52分離純化得到9個(gè)多糖組分：P50-1、P50-2、P70-1、P70-2、P70-3、P90-1、P90-2、AP-1、AP-2，部分組分再經(jīng)凝膠柱Sephacryl S-100 HR、Sephacryl S-300 HR和Sephadex G-75柱進(jìn)一步分離純化，得GP70-2、GP70-3、GP90-1A、GP90-1B、GP90-2、GAP-1六個(gè)均一多糖。通過(guò)旋光度測(cè)定、紫外掃描、高效凝膠滲透色譜、液相色譜、氣相色譜、甲基

3、化分析、紅外光譜、核磁共振波譜等方法對(duì)均一多糖進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析。多糖GP70-2、GP70-3、GP90-1A、GP90-1B、GP90-2、GAP-1的旋光度[α]25D分別等于+101°、+90°、-72°、+234°、-71°、-249°；紫外掃描結(jié)果顯示各多糖都不含有核酸和蛋白質(zhì)；高效凝膠滲透色譜法測(cè)得的相對(duì)分子量分別為7.4×104、10.6×104、1.4×104、13.7×104、>140×104和6.9×104Da；其中G

4、P70-2是由半乳糖和阿拉伯糖組成，重復(fù)單元結(jié)構(gòu)中主鏈由(1→3)-α-L-阿拉伯糖和(1→3,6)-β-D-半乳糖組成，支連由(1→6)-β-D-半乳糖和(1→)-β-D-半乳糖組成。GP70-3是由鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、半乳糖、阿拉伯糖組成，重復(fù)單元結(jié)構(gòu)中主鏈由(1→5)-α-L-阿拉伯糖、(1→6)-β-D-半乳糖、(1→3)-β-D-半乳糖、(1→3,6)-β-D-半乳糖組成，支連由(1→2,3,5)-α-L-阿拉伯糖

5、、(1→3)-α-L-阿拉伯糖、(1→3)-β-D-鼠李糖、(1→3)-β-D-葡萄糖醛酸、(1→3)-β-D-半乳糖醛酸和(1→)-β-D-半乳糖組成。GP90-1A是由(1→6)-α-D-葡萄糖組成葡聚糖。GP90-1B由葡萄糖和阿拉伯糖組成,重復(fù)單元結(jié)構(gòu)中主鏈由(1→5)-α-L-阿拉伯糖、(1→2,3,5)-α-L-阿拉伯糖(1→3)-α-L-阿拉伯糖組成，支鏈由(1→6)-β-D-葡萄糖和(1→)-β-D-葡萄糖及(1→)-α

6、-L-阿拉伯糖組成。GAP-1是由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖組成，主鏈由(1→3,6)-β-D-半乳糖和(1→6)-β-D-半乳糖組成，支連由(1→2,3,5)-α-L-阿拉伯糖、(1→3)-α-L-阿拉伯糖、(1→3)-β-D-鼠李糖、(→1)-β-D-葡萄糖醛酸、(→1)-β-D-葡萄糖和(→1)-β-D-甘露糖組成。生物活性測(cè)試：DPPH.自由基清除實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：GP70-2濃度為10mg/ml時(shí)，DPP

7、H.自由基清除率為47.6%；GP70-3濃度為1mg/ml時(shí)，DPPH.自由基清除率為16.5%；GP90-1B濃度為9mg/ml時(shí)，DPPH.自由基清除率為21.3%。OH.自由基清實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：GP70-2濃度為9mg/ml時(shí)，OH.自由基清除率為47.7%。GP70-3濃度為9mg/ml時(shí)，OH.自由基清除率為32.3%。GP70-2、GP70-3和GP90-2有一定的α-葡萄糖苷酶活性抑制作用，濃度為5mg/mL時(shí)，它們的抑制