外源性超氧化物歧化酶拮抗6-OHDA誘導(dǎo)大鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文外源性超氧化物歧化酶拮抗6OHDA誘導(dǎo)大鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元凋亡的實(shí)驗(yàn)研究姓名：徐強(qiáng)申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)外科指導(dǎo)教師：徐如祥2001.5.1中文摘要l／卜，f帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)是一種與年齡相關(guān)的神經(jīng)變性疾病，中老年人多見，主要是黑質(zhì)紋狀體區(qū)的多巴胺(DA)能神經(jīng)元的進(jìn)行性變性和死亡。其主要的發(fā)病機(jī)制是氧化應(yīng)激，線粒體功能不全，內(nèi)源性毒素，神經(jīng)營養(yǎng)因子保護(hù)作用F降，最終引

2、起多巴胺神經(jīng)元的變性和死亡0由于多巴胺的氧化代謝產(chǎn)物H20：和別的氧反應(yīng)性物質(zhì)(ROS)在帕金森病發(fā)病過程中所起的重要作用，氧化應(yīng)激備受關(guān)注。6OHDA誘導(dǎo)的偏側(cè)帕金森病模型鼠是研究帕金森病的常用動物模型，明確注入6OHDA腦區(qū)內(nèi)的氧化應(yīng)激狀態(tài)與神經(jīng)元凋亡的關(guān)系，以及抗氧化物酶的活性是應(yīng)用抗氧化物酶基因轉(zhuǎn)導(dǎo)治療帕金森病實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)和前提。／本實(shí)驗(yàn)用健康成年雄性sD大鼠144只，隨機(jī)分九組，分別為正常組、對照組、損傷組、實(shí)驗(yàn)對照組和實(shí)驗(yàn)

3、A、B、C、D、E組。損傷組是在大鼠右側(cè)黑質(zhì)區(qū)立體定向注射6OHDA(10垤／6m)；對照組是采用相同方法，以同等量的生理鹽水代替6OHDA向同～靶點(diǎn)注射；實(shí)驗(yàn)組則是采用相同方法，在注入6OHDA的前1小時、同時、后1小時、7小時和12小時注入外源性SOD蛋白90IU／6p1于大鼠右側(cè)黑質(zhì)區(qū)，分別為A、B、C、D、E組。實(shí)驗(yàn)對照組是生理鹽水(6p1)與6OHDA(10垤／6肛1)同時注入大鼠右側(cè)黑質(zhì)區(qū)。術(shù)后10天用阿撲嗎啡腹腔注射誘導(dǎo)大

4、鼠的旋轉(zhuǎn)行為。應(yīng)用試劑盒檢測動物雙側(cè)中腦組織的總抗氧化能力、活性氧、TSOD和CuZn—SOD活性，以明確中腦內(nèi)的氧化應(yīng)激狀況。應(yīng)用抗TH免疫組化染色法和TUNEL法觀察中腦黑質(zhì)部位多巴胺能神經(jīng)元和凋亡細(xì)胞，明確6OHDA致多巴胺能神經(jīng)元凋亡和外源性SOD的拮抗作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1行為學(xué)改變：術(shù)后lO天用05mg／kg阿撲嗎啡腹腔注射檢測各組大鼠的旋轉(zhuǎn)行為。實(shí)驗(yàn)對照組、損傷大鼠旋轉(zhuǎn)圈數(shù)最多，平均轉(zhuǎn)速分別為187919圈／30min，166