接頭蛋白Gab1通過(guò)PI3K途徑促進(jìn)TLRs和RIG-I介導(dǎo)的天然免疫反應(yīng).pdf

1、天然免疫反應(yīng)是機(jī)體的第一道防線，時(shí)刻應(yīng)對(duì)病原體的入侵，包括對(duì)于最初入侵的病毒、細(xì)菌保守組分的識(shí)別等等，以及后續(xù)的對(duì)于繼發(fā)性免疫反應(yīng)的活化與調(diào)控。而模式識(shí)別受體(Pattern—recognitionreceptors，PRRs)在機(jī)體監(jiān)測(cè)入侵的病毒和細(xì)菌組分并啟動(dòng)天然免疫反應(yīng)的過(guò)程中發(fā)揮了極其重要的作用。其中，Toll樣受體(TLRs)和維甲酸誘導(dǎo)基因I(RIG—I)樣螺旋酶在細(xì)胞產(chǎn)生Ⅰ型干擾素(Interferon，IFN)和促炎性細(xì)

2、胞因子、清除病原體的作用過(guò)程中起到了必不可少的作用。然而，促進(jìn)TLRs和RIG—I介導(dǎo)的天然免疫反應(yīng)充分活化的機(jī)制尚未十分清楚，還有待進(jìn)一步深入研究。 Grb2相關(guān)結(jié)合蛋白1(Grb2-associatedbinder1，Gab1)是一個(gè)腳手架/接頭蛋白，主要參與膜表面受體酪氨酸激酶和非受體酪氨酸激酶的信號(hào)傳遞過(guò)程，包括生長(zhǎng)因子類受體、細(xì)胞因子類受體、T/B細(xì)胞受體、Fc受體等等介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程。Gab1在TLRs或RIG—I

3、等介導(dǎo)的天然免疫反應(yīng)過(guò)程中的作用，尚未見(jiàn)報(bào)道。在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)Gab1參與TLRs和RIG—I介導(dǎo)的信號(hào)通路，促進(jìn)天然免疫反應(yīng)的充分活化，起到一個(gè)信號(hào)放大的作用。 首先我們觀察到了在巨噬細(xì)胞中Gab1顯著促進(jìn)了TLR4—、TLR3—andRIG—I介導(dǎo)的interleukin-6(IL-6)、IL-1βandIFN—α/β的產(chǎn)生。小鼠原代腹腔巨噬細(xì)胞內(nèi)Gab1特異性的siRNA干擾或者Gab1基因缺陷的小鼠成纖維細(xì)胞經(jīng)TLR

4、4—、TLR3—andRIG—I介導(dǎo)的interleukin-6(IL-6)、IL-1βandIFN—α/β的產(chǎn)生顯著降低；而穩(wěn)定過(guò)表達(dá)Gab1的巨噬細(xì)胞經(jīng)TLR誘導(dǎo)的上述促炎性細(xì)胞因子和Ⅰ型干擾素的表達(dá)則顯著升高。相一致的是，Gab1基因缺陷減少了水泡性口炎病毒(VSV)感染誘導(dǎo)的．IFN—α/β，以及IFN誘導(dǎo)基因IP-10和RANTES的產(chǎn)生。 除了促進(jìn)MyD88依賴和TRIF依賴的MAPKs和NF—κB途徑的活化以外，在

5、TLRs和RIG—I信號(hào)通路中，Gab1通過(guò)直接結(jié)合PI3K的p85亞基，促進(jìn)PI3K/Akt活性。阻斷PI3K/Akt通路減少了Gab1上調(diào)的IL-6和IFN—β產(chǎn)生。因此，在TLR4—、TLR3—andRIG—I介導(dǎo)的天然免疫反應(yīng)過(guò)程中，Gab1通過(guò)促進(jìn)PI3K/Akt、MAPKs和NF—κB的活性，促進(jìn)了信號(hào)通路的充分活化。Gab1在小鼠腹腔巨噬細(xì)胞是組成性高表達(dá)的，而在TLR4活化后Gab1發(fā)生迅速而持續(xù)性的表達(dá)下調(diào)。Gab1的