食管鱗癌中脆性組氨酸三聯(lián)體和Langerhans細(xì)胞的蛋白表達(dá)及其相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景和目的： 食管癌是人類最常見的惡性腫瘤之一，近年來(lái)隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)腫瘤的形成是一個(gè)多階段多步驟的復(fù)雜過(guò)程，其中有多種基因功能失常，包括原癌基因的激活與抑癌基因的滅活等，最終引起細(xì)胞的異常增殖而導(dǎo)致腫瘤形成。特別是近年來(lái)，基因改變?cè)谑彻馨┌l(fā)生發(fā)展中的作用及機(jī)制逐漸被人們所認(rèn)識(shí)，這將對(duì)其病因、發(fā)病機(jī)制及診治產(chǎn)生巨大影響。 脆性組氨酸三聯(lián)體(fragile histine traid，F(xiàn)HIT)基因作

2、為一種新的候選抑癌基因，其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物異常及FHIT基因蛋白表達(dá)缺失或減少已在多種原發(fā)腫瘤及腫瘤細(xì)胞株中得到證實(shí)，尤其在和環(huán)境致癌因素密切相關(guān)的腫瘤，如消化系統(tǒng)惡性腫瘤、肺癌、鼻咽癌、頭頸部腫瘤及乳腺癌等腫瘤中，病變?cè)缙诩纯捎蠪HIT基因異常。目前許多學(xué)者的研究結(jié)果表明： FHIT基因的缺失或減少不但與腫瘤的發(fā)生有著密切關(guān)系，而且與腫瘤的病理分期、分化程度、浸潤(rùn)及淋巴轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)。但也有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)FHIT基因的缺失與腫瘤的大小、部位、浸

3、潤(rùn)深度、分級(jí)分期及淋巴轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)性。所以，F(xiàn)HIT基因作為一種抑癌基因雖然已被證實(shí)，但其與腫瘤的病理分期、分化程度、浸潤(rùn)及淋巴轉(zhuǎn)移等方面的關(guān)系尚有待進(jìn)一步研究。 研究表明機(jī)體的免疫功能狀態(tài)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著密切關(guān)系，抗原遞呈過(guò)程及T細(xì)胞的活化在腫瘤免疫中具有關(guān)鍵性的作用，機(jī)體的免疫機(jī)能下降，可促使癌基因激活，抑癌基因突變或失活。Langerhans細(xì)胞(LC)作為一種抗原遞呈細(xì)胞(antigen-presenting cel

4、l，APC)，近來(lái)與腫瘤的關(guān)系受到人們的普遍關(guān)注。目前已有許多學(xué)者的研究證實(shí)了LC的變化與許多腫瘤的發(fā)生有著密切關(guān)系，但其與腫瘤的病理分期、浸潤(rùn)、淋巴轉(zhuǎn)移及細(xì)胞的分化程度等方面的關(guān)系各文獻(xiàn)報(bào)道并不一致，還有待進(jìn)一步研究。鑒于FHIT基因是一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因，從理論上推測(cè)， LC數(shù)量的減少與FHIT基因的缺失在腫瘤發(fā)生中應(yīng)該存在協(xié)同作用，但有關(guān)FHIT蛋白與LC在腫瘤組織中表達(dá)的相關(guān)性國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)均未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)擬采用免疫組化技術(shù)，通過(guò)

5、研究食管癌中FHIT蛋白的表達(dá)、LC數(shù)量的變化及其二者的相關(guān)性，探討FHIT基因和LC與食管癌的發(fā)生發(fā)展及其分化程度、浸潤(rùn)深度和淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系，觀察二者在食管癌發(fā)生中的相關(guān)性，為進(jìn)一步研究食管癌的發(fā)生發(fā)展、治療及預(yù)后判斷提供理論依據(jù)。 方法： 應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)39例正常食管上皮、23例不典型增生及39例食管鱗癌中FHIT蛋白及LC的表達(dá)情況。分析FHIT蛋白的缺失和LC數(shù)量的變化與食管癌的發(fā)生發(fā)展及其分化程度、

6、浸潤(rùn)深度和淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系，并探討二者的相關(guān)性。FHIT蛋白表達(dá)結(jié)果的判斷根據(jù)FHIT蛋白的染色強(qiáng)度和染色范圍，以≤3分為FHIT蛋白表達(dá)陰性，>3分為表達(dá)陽(yáng)性；LC表達(dá)結(jié)果的判斷根據(jù)LC計(jì)數(shù)，以<6個(gè)為陰性，>6個(gè)為陽(yáng)性。用SPSS10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以α=0.05為顯著性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果： 1．FHIT蛋白定位于細(xì)胞漿和細(xì)胞核。正常食管上皮、癌旁不典型增生和癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為89.74％、52.17％、

7、28.21％，差異有顯著性(P<0.01)。39例鱗癌中，高分化、中分化和低分化的陽(yáng)性表達(dá)率分別為55.56％、36.36％、10.53％，差異有顯著性(P<0.05)；侵犯淺肌層、深肌層和纖維膜的陽(yáng)性表達(dá)率分別為33.33％、40％、25％，差異無(wú)顯著性(P>0.05)；無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移和有淋巴轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性表達(dá)率分別為38.46％和7.69％，差異有顯著性(P<0.05)。 2．S-100蛋白陽(yáng)性LC定位于細(xì)胞漿。正常食管上皮、癌旁不

8、典型增生和癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為64.10％、30.43％、41.03％，差異有顯著性(P<0.05)。 39例鱗癌中，高分化、中分化和低分化的陽(yáng)性表達(dá)率分別為77.78％、45.45％、21.05％，差異有顯著性(P<0.01)；浸潤(rùn)淺肌層、深肌層和纖維膜的陽(yáng)性表達(dá)率分別為33.33％、40％、42.86％，差異無(wú)顯著性(P>0.05)；無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移和有淋巴轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性表達(dá)率分別為53.85％、15.38％，差異有顯著性(P<

9、0.01)。 3．23例不典型增生和39例食管鱗癌FHIT蛋白表達(dá)陽(yáng)性和陰性病例中，LC陽(yáng)性表達(dá)率分別為43.48％和33.33％，二者差異無(wú)顯著性(P>0.05)。 結(jié)論： 1． FHIT蛋白表達(dá)陽(yáng)性率在食管正常上皮、癌旁不典型增生及鱗癌組織中逐漸降低，表明FHIT蛋白的缺失與食管鱗癌的發(fā)生密切相關(guān)。 2． FHIT蛋白在食管鱗癌中的陽(yáng)性表達(dá)率與腫瘤細(xì)胞的分化程度及淋巴轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，而與腫瘤的浸潤(rùn)深度無(wú)