CT259、CT703基因在沙眼衣原體感染細(xì)胞中的表達(dá)研究.pdf

1、目的: 分析沙眼衣原體（Chlamydia trachomatis，Ct）L2血清型在急性感染和持續(xù)感染兩種狀態(tài)下，其基因CT259、CT703的mRNA及蛋白表達(dá)，為進(jìn)一步研究?jī)苫虻纳飳W(xué)效應(yīng)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法: 1.用IFN-γ處理Ct感染的HeLa細(xì)胞，吉姆薩染色光學(xué)顯微鏡觀察、以及電鏡觀察，確定沙眼衣原體持續(xù)感染細(xì)胞模型建立。 2.采用RT-PCR方法檢測(cè)基因CT259、CT703 mRNA在

2、不同細(xì)胞模型中的表達(dá)。 3.采用Western-blot的方法檢測(cè)基因CT259、CT703編碼蛋白在不同細(xì)胞模型中的表達(dá)。 結(jié)果: 1.成功建立Ct持續(xù)感染細(xì)胞模型。 2.RT-PCR結(jié)果顯示：Ct持續(xù)感染狀態(tài)下，在宿主細(xì)胞中6h開始檢測(cè)到CT259的表達(dá)，12小時(shí)開始檢測(cè)到CT703的表達(dá)，持續(xù)感染狀態(tài)下CT259、CT703的表達(dá)量無時(shí)間依賴性；Ct急性感染狀態(tài)下，在宿主細(xì)胞中6小時(shí)開始檢測(cè)到CT2

3、59的表達(dá)，12小時(shí)開始檢測(cè)到CT703的表達(dá)，隨感染時(shí)間的延長(zhǎng)CT259、CT703 mRNA表達(dá)量逐漸增加，具時(shí)間依賴性。將持續(xù)感染與急性感染各相同時(shí)間點(diǎn)CT259、CT703 mRNA灰度值相比較，發(fā)現(xiàn)持續(xù)感染狀態(tài)下CT259、CT703 mRNA表達(dá)水平明顯低于急性感染狀態(tài)，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 3.Western-blot結(jié)果顯示：Ct持續(xù)感染狀態(tài)下，在宿主細(xì)胞內(nèi)24h可檢測(cè)到CT259和CT703的表

4、達(dá)，表達(dá)量無時(shí)間依賴性；Ct急性感染狀態(tài)下，24h可檢測(cè)到CT259和CT703的表達(dá)；隨感染時(shí)間的延長(zhǎng)，蛋白質(zhì)表達(dá)量逐漸增加，具時(shí)間依賴性；相同時(shí)間點(diǎn)持續(xù)感染狀態(tài)下CT259、CT703編碼蛋白的量明顯低于急性感染狀態(tài)。 結(jié)論: 1.成功建立沙眼衣原體持續(xù)感染細(xì)胞模型。 2.Ct持續(xù)感染狀態(tài)下基因CT259、CT703 mRNA水平顯著低于急性感染狀態(tài)。 3.Ct持續(xù)感染狀態(tài)下基因CT259、CT703