小麥種質(zhì)貴農(nóng)775抗條銹病基因標(biāo)記的相關(guān)片段克隆及熒光原位雜交.pdf

1、小麥抗病種質(zhì)貴農(nóng)775是原貴州大學(xué)張慶勤教授利用遠緣雜交育成的著名抗源材料，在抗病育種和生產(chǎn)上具有重要的應(yīng)用價值。本研究利用分子標(biāo)記和熒光原位雜交技術(shù)對其進行了研究，研究取得的主要結(jié)果如下： 1.將貴農(nóng)775中與YrGA連鎖的標(biāo)記片段克隆并轉(zhuǎn)為更穩(wěn)定的SCAR標(biāo)記，用SCAR標(biāo)記同時驗證條中32號小種接種鑒定的西農(nóng)97148×貴農(nóng)775雜交種F2代的群體，根據(jù)驗證結(jié)果統(tǒng)計分析表明YrGA基因的遺傳符合3R∶1S。估算這2個標(biāo)記位

2、點與相應(yīng)的抗條銹病基因各自的遺傳距離；RAPD引物S2018標(biāo)記位點與抗條銹病基因YrGA之間的遺傳距離為： 2.378±0.0064cM；SCAR引物SCARs2018RL-140標(biāo)記位點與抗條銹病基因YrGA之間的遺傳距離為：0.355±0.001cM；同時用SCARs2018R與SCARS2018L引物組合和Pm21C與Pm21D引物組合檢測貴農(nóng)775、簇毛麥和揚麥5號，結(jié)果表明Pm21C與Pm21D引物組合不能在貴農(nóng)77

3、5中擴增出1.4kb特異帶，而SCARs2018R與SCARS2018L引物組合同時能在貴農(nóng)775、簇毛麥和揚麥5號中擴增出140bp的特異帶；證明貴農(nóng)775簇毛麥易位系不同于劉大鈞等的研究結(jié)果。 2.用熒光原位雜交技術(shù)鑒定貴農(nóng)775為簇毛麥的新的易位系，用特異引物S2018擴增探針作雜交進一步證明了與YrGA基因的連鎖標(biāo)記也是來自簇毛麥。在用熒光原位雜交時，針對性優(yōu)化了熒光原位雜交過程中的一些參數(shù)，染色體制片中用了α-溴萘，2