復(fù)方紫杉醇-拉帕替尼PEg-PLA膠束治療HER2陽性乳腺癌的研究.pdf

1、高達(dá)30％的侵襲性乳腺癌患者過表達(dá)人表皮生長因子受體2(HER2)，這類乳腺癌患者的病情進(jìn)展較快，無瘤生存期及總生存期短。拉帕替尼臨床上主要用于治療復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移、對赫賽汀產(chǎn)生耐藥的HER2陽性乳腺癌患者，具有諸多臨床優(yōu)勢，但存在水溶性差的關(guān)鍵問題，難以制備注射劑;而目前口服拉帕替尼存在生物利用度低、給藥劑量大、頻次高等問題，導(dǎo)致患者的依從性降低。紫杉類藥物（紫杉醇、多西紫杉醇）是目前治療轉(zhuǎn)移性乳腺癌的主要用藥之一，但紫杉類藥物高度不溶于水，

2、在注射劑制各時(shí)需要以聚氧乙烯蓖麻油及無水乙醇為助溶劑，由此可能誘發(fā)患者產(chǎn)生致命的過敏反應(yīng)，也在一定程度上限制了紫杉類藥物的臨床應(yīng)用。兩類藥物均存在難溶性問題，且在臨床上有聯(lián)合應(yīng)用的需求。
　　納米給藥系統(tǒng)的問世為臨床腫瘤的化學(xué)藥物治療創(chuàng)造了新的突破點(diǎn)，以聚合物膠束作為載體既能解決藥物的溶解度問題，又能延長藥物在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間;同時(shí)聚合物膠束的納米級粒徑能實(shí)現(xiàn)對腫瘤組織的被動(dòng)靶向作用。
　　本文采用不同的處方工藝，制備了兩種復(fù)

3、方紫杉醇-拉帕替尼的聚乙二醇-聚乳酸(PEG-PLA)膠束，以期增加藥物的溶解度，同時(shí)利用兩藥物的協(xié)同作用提高對HER2陽性乳腺癌的治療效果。
　　第一章將拉帕替尼與PEG-PLA結(jié)合制備LPT-PEG-PLA，再采用薄膜水化法制備L-PPM-PTX膠束，測得紫杉醇的載藥量與包封率分別為14.82±2.16％、84.21±9.83％，粒徑為25.80±0.47 nm，多分散指數(shù)為0.202±0.019。共聚焦熒光顯微鏡觀察見L-P

4、PM-PTX能夠通過內(nèi)體進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)并釋放至胞質(zhì)。流式細(xì)胞技術(shù)檢測藥物作用后L-PPM-PTX對于HER2過表達(dá)乳腺癌細(xì)胞株SKBr-3的抑制作用優(yōu)于PPM-PTX及L-PPM;而SKBr-3細(xì)胞周期分布結(jié)果提示其可以同時(shí)將細(xì)胞阻滯于G2/M及G1/S期。細(xì)胞核染色結(jié)果與流式細(xì)胞檢測結(jié)果一致。
　　為了解決薄膜水化法的不足，提高拉帕替尼的載藥量，第二章以DMSO為溶劑，采用透析法制備復(fù)方PPM-PL膠束。以膠束粒徑及載藥量為考察指標(biāo)

5、，在單因素考察的基礎(chǔ)上，采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)面法對PPM-PL的處方和制備工藝進(jìn)行優(yōu)化，最優(yōu)處方工藝為:mPEG-PLA50 mg，拉帕替尼7.3 mg，紫杉醇7.3 mg，透析時(shí)間19.4 h。依據(jù)最優(yōu)處方制備的PPM-PL粒徑與多分散指數(shù)為20.05±0.09nm、0.193±0.01;拉帕替尼的載藥量與包封率為6.02±0.29％、43.88±2.21％，紫杉醇的載藥量與包封率為9.93±1.17％、75.60±9.85％。采用HE

6、R2過表達(dá)細(xì)胞株SKBr-3皮下注射構(gòu)建HER2陽性乳腺癌裸鼠模型，利用小動(dòng)物活體成像系統(tǒng)考察游離DiR及載DiR膠束在荷瘤鼠體內(nèi)的分布情況，結(jié)果提示載DiR膠束組在荷瘤鼠腫瘤處的熒光強(qiáng)度顯著強(qiáng)于游離DiR組，說明共聚物膠束的被動(dòng)靶向作用使其能在腫瘤部位蓄積，預(yù)示有利于抗腫瘤治療。通過腫瘤體積變化曲線考察PPM-PL對HER2陽性乳腺癌的藥效學(xué)，結(jié)果顯示PPM-PL的抗腫瘤效果優(yōu)于單藥或游離單藥聯(lián)合組。
　　綜上所述，本文制備的P