基于中藥血清藥理學(xué)的黃藥子及配伍當歸后減毒增效性研究.pdf

1、近年來,在臨床上黃藥子多用于治療甲狀腺腫和各型癌癥等癥,尤其在治療抗癌方面尤顯突出,但在臨床用藥過程中還發(fā)現(xiàn)黃藥子具有一定的毒性反應(yīng),其毒性可引起肝、腎的損傷。據(jù)有關(guān)報道,肝、腎損傷的程度與給藥劑量和時間有關(guān),對肝臟的損傷在短時間內(nèi)即可表現(xiàn)出來,對腎臟的損傷在長期使用后才能顯現(xiàn)。據(jù)文獻報道,因服用黃藥子引起的藥源性肝炎已達50余例,其中3例死亡。但有研究表明當歸配伍黃藥子后,可明顯減輕單用黃藥子對肝細胞的損害程度,并且對腎臟的損害也有一

2、定的緩解作用。因此,本研究應(yīng)用中藥血清藥理學(xué)方法進一步探討黃藥子肝毒性及配伍后的減毒作用機理,其對臨床合理、安全用藥具有重要的指導(dǎo)意義。 中藥血清藥理學(xué)是一種適合中藥特點的進行體外實驗的一種新的藥理方法學(xué),它排除了傳統(tǒng)中藥體外實驗中中藥本身的理化性質(zhì)對實驗結(jié)果的干擾,又能反映藥物在體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化過程及其作用結(jié)果。本研究是在已有研究成果基礎(chǔ)上,利用中藥血清藥理學(xué)實驗方法對黃藥子及其配伍當歸的抗腫瘤作用和肝毒性進行深入研究,并通過H

3、PLC、MTT實驗、P-糖蛋白(P-gp)、細胞毒性檢測及生化指標的檢測等技術(shù)進一步探討黃藥子的毒效和當歸對黃藥子毒性的影響及其減毒機制。具體結(jié)果如下： 1.用HPLC分析法確定黃藥子及配伍當歸含藥血清的最佳采血時間,結(jié)果表明黃藥子及配伍當歸的含藥血清在30min時達到最高峰,但代謝較快,60-180min時里穩(wěn)定狀態(tài),入血成分多,峰值高,最后確定給藥后60min為含藥血清最佳采血時間。 2.應(yīng)用MTT實驗觀察黃藥子及配

4、伍當歸的含藥血清對肉瘤細胞(S180)和肝癌細胞(H22)增殖的抑制作用。結(jié)果顯示黃藥子及配伍當歸的含藥血清在48h時抑瘤效果最好,其抑制率分別為37.18％、11.90％及45.56％、21.54％,說明黃藥子配伍當歸起到了增效的作用,當歸可能通過某種環(huán)節(jié)增強了黃藥子的抑瘤效果。 3.黃藥子及配伍當歸含藥血清在H22、S180中對P-gP表達的影響變化。研究結(jié)果表明,細胞內(nèi)蓄積的Rho-123的熒光強度在0.5h到1h吸收最快

5、,空白血清組在1h達到最大吸收后無明顯變化,黃藥子組在2h后熒光強度明顯低于空白血清組,配伍組在達到最大吸收的1h后明顯大于黃藥子組,使黃藥子組引起升高的P-gP表達降低。由此闡明黃藥子配伍當歸后可通過降低P-gP表達增強黃藥子的抗腫瘤療效,是其拮抗黃藥子毒性的作用機制之一。 4.觀察分析黃藥子及配伍當歸含藥血清對體外肝細胞的存活率和GPT、GOT、LDH的酶活性影響。實驗結(jié)果表明黃藥子使正常大鼠肝細胞存活率明顯下降與空白組顯著

6、性差異(P<0.05),而配伍組細胞的存活率明顯提高與空白組無顯著性差異(P>0.05)。黃藥子對肝細胞有損傷作用,可引起胞內(nèi)GOT、GPT、LDH泄漏,培養(yǎng)上清液中GOT、GPT、LDH活性與空白組比明顯升高(P<0.01),GOT和GPT為肝細胞受損的特征性酶譜,LDH活性的升高提示細胞膜完整性受損,說明黃藥子具有潛在肝毒性。配伍組LDH、GOT、GPT的活性受到抑制,與空白組無顯著性差異(P>0.05),說明當歸對肝細胞有一定的保