軟骨源性形態(tài)發(fā)生蛋白-2誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)軟骨細(xì)胞表型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究軟骨源性形態(tài)發(fā)生蛋白—2(CDMP—2)對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)向軟骨分化的作用。 方法：體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)，貼壁細(xì)胞傳代，取第3代細(xì)胞，對(duì)照組(A組)以L—DMEM無(wú)血清培養(yǎng)液培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)組(B、C、D組)以L—DMEM無(wú)血清培養(yǎng)液培養(yǎng)，分別加入CDMP—2(100ng/ml)、TGF-β1(10ng/ml)和CDMP—2(100ng/ml)+ TGF-β1(10ng/ml)，倒置相

2、差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，14天后終止培養(yǎng)，行甲苯胺藍(lán)染色，免疫組織化學(xué)染色和Western blot檢測(cè)軟骨特異性Ⅱ型膠原的表達(dá)。 結(jié)果：誘導(dǎo)14天后可見(jiàn)BMSCs形態(tài)由梭形向軟骨細(xì)胞的多邊形轉(zhuǎn)變。甲苯胺藍(lán)染色示糖胺聚糖(GAGs)均勻分布于基質(zhì)中，免疫組織化學(xué)染色和Western blot示實(shí)驗(yàn)組Ⅱ型膠原表達(dá)陽(yáng)性，且CDMP—2+TGF-β1組細(xì)胞表達(dá)Ⅱ型膠原水平高于單獨(dú)給予CDMP—2、TGF-β1組(P<0.05)；對(duì)照組未