肉蓯蓉有效成份分析及指紋圖譜研究.pdf

1、本課題的研究方向是，中藥有效成份的分析和指紋圖譜研究。以中藥肉蓯蓉為研究對象，建立了測定肉蓯蓉中幾種有效成份含量的方法。同時，采用高效液相色譜法對肉蓯蓉的指紋圖譜進行了初步的研究。課題的研究內(nèi)容主要包括以下四個部分：1.毛細管電泳法測定肉蓯蓉中的甘露醇及其糖類物質(zhì)；2.毛細管電泳電化學檢測法研究肉蓯蓉多糖的單糖組成；3.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法測定肉蓯蓉中的甜菜堿：4.肉蓯蓉的高效液相色譜指紋圖譜研究。 第一部分，采用毛細

2、管電泳電化學檢測法測定了肉蓯蓉中的甘露醇及其幾種糖類物質(zhì)的含量。同時，研究了電極電位、運行緩沖液濃度、分離電壓及進樣時間等電泳條件對測定的影響。得到了最佳電泳條件：電極電位0.65 V(vs.SCE)、分離電壓21 kV、電動進樣6 s、運行緩沖液0.10 mol/LNaOH溶液。在此優(yōu)化條件下，甘露醇、蔗糖、葡萄糖、果糖得到很好的分離。在1×10<'-5>mol/L～1×10<'-3>mol/L的范圍內(nèi)存在良好的線性關(guān)系，方法檢測限低

3、，回收率測定結(jié)果說明該法準確、可靠。對內(nèi)蒙、甘肅、新疆三地產(chǎn)肉蓯蓉的測定表明，不同產(chǎn)地的肉蓯蓉藥材中甘露醇、蔗糖、葡萄糖、果糖的相對含量不同，甘肅產(chǎn)肉蓯蓉的甘露醇含量較高，新疆野生肉蓯蓉的果糖含量豐富。此結(jié)果為肉蓯蓉的合理利用及開發(fā)提供了有利的參考依據(jù)。 第二部分，利用毛細管電泳電化學檢測法研究了肉蓯蓉多糖的單糖組成，比較不同種肉蓯蓉粗多糖的單糖組成差異。采用超聲提取、沸水抽提、Sevag法脫蛋白、乙醇沉淀等一系列步驟制備水溶性

4、肉蓯蓉粗多糖，將所得粗多糖在稀酸溶液中水浴100℃條件下水解。利用毛細管電泳．電化學檢測研究水解液中單糖的種類及其相對組成。實驗結(jié)果表明，肉蓯蓉粗多糖由葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖、果糖等組成。不同種及天然與人工栽培的肉蓯蓉粗多糖的單糖組成有明顯差異。實驗結(jié)果為肉蓯蓉多糖結(jié)構(gòu)的進一步研究奠定了理論基礎(chǔ)。 第三部分，建立了高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測法測定肉蓯蓉中甜菜堿含量的方法。研究了色譜柱、流動相組成、蒸發(fā)光散射檢測器參數(shù)

5、等因素對甜菜堿測定的影響，得到了最優(yōu)化的測定條件：色譜柱：Waters Spherisorb S5 NH<,2>(250 mm×4.6 mm i.d，5μm)；流動相：0.1％三氟乙酸：甲醇=15：85(體積分數(shù))；檢測器參數(shù)：漂移管溫度，90℃；噴霧器溫度，45℃；載氣壓力，16 psi。結(jié)果表明，方法具有精密度高、簡便、快速的特點。采用該法對不同種肉蓯蓉中甜菜堿含量的測定結(jié)果表明：管花肉蓯蓉不含甜菜堿，因此，該法對于鑒別正品肉蓯蓉和

6、管花肉蓯蓉具有一定的參考價值。 第四部分，采用高效液相色譜法建立了不同產(chǎn)地肉蓯蓉藥材的指紋圖譜。研究了流動相、梯度洗脫條件及檢測波長的選擇對肉蓯蓉指紋圖譜的影響，得到了優(yōu)化的測定條件。色譜條件：色譜柱，NUCLEODUR 100-5 C<,18>(250 mm ×4.6 mm i.d，5 μm)；流動相，甲醇：0.1％三氟乙酸梯度洗脫：流速，0.6 mL/min；檢測波長，243 nm。蒸發(fā)光散射檢測器參數(shù)：漂移管溫度，90℃；