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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過(guò)綠熒光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)轉(zhuǎn)基因小鼠骨髓移植和3-甲基膽蒽誘癌實(shí)驗(yàn)探討骨髓源干細(xì)胞(bone marrow derived stem cell,BMSC)在上皮組織惡性腫瘤發(fā)生和進(jìn)展中的作用。
方法:本實(shí)驗(yàn)采用6周齡、雌性C57BL/6-GFP小鼠為供體,雄性、C57BL/6小鼠為受體建立骨髓移植模型,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry,FCM)鑒定模型是否
2、構(gòu)建成功。骨髓移植術(shù)后4周于小鼠腺胃掛含有3.甲基膽蒽(3-Methylcholanthrene,3-MCA)的線結(jié)誘導(dǎo)小鼠胃癌前病變并采用熒光顯微鏡及熒光原位雜交(Fluorescence In Situ Hybridization,FISH)技術(shù)檢測(cè)腫瘤組織是否存在表達(dá)GFP及含Y染色體的雙陽(yáng)性細(xì)胞。
結(jié)果:
1、嵌合體小鼠骨髓細(xì)胞FCM檢測(cè)結(jié)果顯示移植骨髓四周后骨髓GFP+細(xì)胞達(dá)94.78%±2.5%。
3、
2、12周時(shí)80%小鼠出現(xiàn)腺胃部位的粘膜增厚及慢性炎癥。20周時(shí)16.7%小鼠成功誘導(dǎo)出小鼠胃粘膜不典型增生。對(duì)照組小鼠見(jiàn)局部粘膜增厚,無(wú)慢性炎癥或胃腺癌前病變。
3、對(duì)照組小鼠胃腺體未見(jiàn)GFP+細(xì)胞表達(dá),僅間質(zhì)部位可見(jiàn)少量GFP+細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)組小鼠胃腺體可見(jiàn)GFP+細(xì)胞,其中不典型增生部位GFP局限性高表達(dá),且同時(shí)可檢測(cè)到Y(jié)染色體,間質(zhì)部位也可見(jiàn)GFP+細(xì)胞。
4、肝臟,腎臟及腦實(shí)質(zhì)的血管壁、
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