STAT3和SOCS3表達(dá)對(duì)人肝細(xì)胞癌惡性演進(jìn)作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開(kāi)論述：
　　目的:檢測(cè)人肝細(xì)胞癌和癌旁非腫瘤病變組織中STAT3、SOCS3、Ki67和VEGF的表達(dá),并觀察STAT3和SOCS3與肝細(xì)胞癌臨床病理特征和患者預(yù)后的關(guān)系,探討STAT3和SOCS3與臨床肝細(xì)胞癌發(fā)生和演進(jìn)的相關(guān)性及其臨床意義。
　　方法:構(gòu)建組織微陣列平臺(tái),應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法檢測(cè)140例肝細(xì)胞癌和112例癌旁非腫瘤組織pSTAT3、SOCS3、Ki67和VEGF蛋白的表達(dá),原

2、位分子雜交技術(shù)檢測(cè)STAT3 mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.140例肝細(xì)胞癌和112例癌旁非腫瘤組織的微陣列樣本中,2例含有過(guò)少或不含有腫瘤組織,2例樣本在切片、免疫組化或原位雜交染色過(guò)程中脫失,成品率為98.4％。
　　2.肝細(xì)胞癌組織中pSTAT3蛋白和STAT3 mRNA表達(dá)均較癌旁非腫瘤組織顯著增強(qiáng)(均P<0.001),而肝細(xì)胞癌SOCS3蛋白表達(dá)較癌旁非腫瘤組織明顯降低(P<0.001)。
　　

3、3.肝細(xì)胞癌組織pSTAT3蛋白表達(dá)與腫瘤大小、臨床分期,Ki67增殖指數(shù)和VEGF表達(dá)均呈顯著正相關(guān)(均P<0.01),并且其表達(dá)與患者總生存期和無(wú)病生存期均呈顯著負(fù)相關(guān)(均P<0.05);而SOCS3蛋白表達(dá)與腫瘤Ki67增殖指數(shù)和VEGF表達(dá)均呈顯著負(fù)相關(guān)(均P<0.01),并且與患者總生存期和無(wú)病生存期均呈顯著正相關(guān)(均P<0.05)。
　　4.相關(guān)性分析顯示,肝細(xì)胞癌組織pSTAT3蛋白表達(dá)與STAT3 mRNA表達(dá)呈顯

4、著正相關(guān)(rs=0.726,P<0.001),而與SOCS3蛋白表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)(rs=-0.606,P<0.001)。
　　結(jié)論:STAT3和SOCS3表達(dá)的失調(diào)可能與肝細(xì)胞癌發(fā)生過(guò)程有關(guān)。pSTAT3表達(dá)與肝細(xì)胞癌病情演進(jìn)密切相關(guān),pSTAT3和SOCS3是輔助判斷肝細(xì)胞癌患者預(yù)后的有效標(biāo)志物。
　　摘要2
　　目的:觀察瞬時(shí)轉(zhuǎn)染特異性siRNA后分別對(duì)人肝癌細(xì)胞STAT3和SOCS3的表達(dá),探討STAT3和SOC

5、S3對(duì)人肝癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響,以及分子機(jī)制。
　　方法:以人肝癌細(xì)胞系HepG2的為研究對(duì)象,使用lipo2000分別瞬時(shí)轉(zhuǎn)染特異性靶向STAT3 siRNA和SOCS3 siRNA,0、24、48、72小時(shí)后用MTS法檢測(cè)siRNA組和陰性對(duì)照組增殖活性;使用“劃痕愈合實(shí)驗(yàn)”分別0、36、72小時(shí)檢測(cè)不同組別肝癌細(xì)胞遷移率;使用“Transwell小室實(shí)驗(yàn)”分別24和36小時(shí)檢測(cè)不同組別肝癌細(xì)胞遷移和侵襲情況。

6、　　結(jié)果:
　　1、STAT3的siRNA組與對(duì)照組相比細(xì)胞增殖活性明顯受到抑制(P<0.01),而SOCS3的siRNA組較對(duì)照組的細(xì)胞增殖活性顯著增加;
　　2、STAT3的siRNA組“劃痕愈合”較對(duì)照組減慢(P<0.01),而SOCS3的siRNA組“劃痕愈合”較對(duì)照組加快(P<0.01);
　　3、“Transwell小室”實(shí)驗(yàn)顯示STAT3的siRNA組肝癌細(xì)胞遷移和侵襲力較對(duì)照組顯著減弱(P<0.01),

7、而SOCS3的siRNA組較對(duì)照組遷移和侵襲力顯著增強(qiáng)(P<0.01)。
　　4、STAT3的siRNA組肝癌細(xì)胞的MMP-2、MMP-9和c-myc表達(dá)較對(duì)照組顯著下調(diào),而SOCS3的siRNA組肝癌細(xì)胞的相關(guān)指標(biāo)表達(dá)較對(duì)照組顯著上調(diào)。
　　結(jié)論:STAT3和SOCS3在肝癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的過(guò)程中可能發(fā)揮了重要作用,這種調(diào)控作用可能是通過(guò)調(diào)控MMP-2、MMP-9和c-myc途徑發(fā)揮作用。
　　摘要3
　

8、　目的:通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)觀察JAK/STAT3信號(hào)通路阻斷劑AG490對(duì)肝細(xì)胞癌裸鼠移植瘤生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為的影響,從體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的角度探討阻斷STAT3通路對(duì)肝細(xì)胞癌生長(zhǎng)、侵襲轉(zhuǎn)移等的抑制作用,以及對(duì)相關(guān)重要基因的影響。以期對(duì)臨床肝細(xì)胞癌的治療提供一定的理論依據(jù)。
　　方法:建立人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞裸鼠異種移植瘤模型并分組。使用AG490、順鉑或生理鹽水處理各組裸鼠。用藥期間連續(xù)測(cè)量裸鼠腫瘤體積,檢測(cè)腫瘤重量并計(jì)算抑瘤率

9、。HE染色檢測(cè)腫瘤局部侵襲和肺臟轉(zhuǎn)移情況。免疫組織化學(xué)檢測(cè)移植瘤組織中pSTAT3、SOCS3、Ki67、c-myc、MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、藥物對(duì)裸鼠移植瘤體積生長(zhǎng)的影響:分別在用藥后第1天、第4天、第7天及第10天測(cè)量腫瘤長(zhǎng)徑(a)、短徑(b),計(jì)算體積,描繪移植瘤生長(zhǎng)曲線圖。結(jié)果可見(jiàn)從用藥第7天開(kāi)始AG490給藥組腫瘤體積顯著小于對(duì)照組(P<0.001)。
　　2、藥物對(duì)裸鼠移植瘤腫

10、瘤細(xì)胞局部侵襲和轉(zhuǎn)移的生物學(xué)的影響:肉眼觀移植瘤呈結(jié)節(jié)狀,腫瘤組織血供豐富,給藥組移植瘤境界清楚,無(wú)明顯周?chē)M織和皮膚浸潤(rùn),易分離,切面呈魚(yú)肉樣。光鏡下觀察給藥組腫瘤細(xì)胞較對(duì)照組局部侵襲力明顯減弱,肺部轉(zhuǎn)移率明顯減少。
　　3、免疫組化結(jié)果:給藥組移植瘤腫瘤細(xì)胞pSTAT3、Ki67、c-myc、MMP-2和MMP-9蛋白表達(dá)較對(duì)照組明顯降低,而SOCS3表達(dá)給藥組明顯高于對(duì)照組。
　　結(jié)論:AG490能夠通過(guò)抑制STAT3