IL-18和MMP-9在人粥樣硬化冠狀動(dòng)脈中的表達(dá)及與斑塊穩(wěn)定性的初步研究.pdf

1、近年來(lái)，人們對(duì)冠心病的病理生理學(xué)的認(rèn)識(shí)有了明顯的轉(zhuǎn)變，動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)被認(rèn)為是主動(dòng)的炎癥性過(guò)程，而不是單純的脂質(zhì)被動(dòng)浸潤(rùn)。在AS斑塊形成、進(jìn)展以及并發(fā)血栓形成過(guò)程中炎癥均展現(xiàn)其重要特征。這一過(guò)程里有眾多的炎癥因子的參與及表達(dá)。其中，IL-18是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一個(gè)重要的多效能細(xì)胞因子，它能夠誘導(dǎo)單核巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞分泌干擾素γ(IFN-γ)，通過(guò)直接和間接途徑促進(jìn)MMP-9的分泌和表達(dá)，促進(jìn)AS的發(fā)生

2、和發(fā)展。 目的：本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)IL-18、MMP-9蛋白及mRNA在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中的表達(dá)水平及兩者相關(guān)性。分析IL-18、MMP-9與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系，為今后臨床有效的對(duì)冠心病進(jìn)行診斷、治療和預(yù)后的評(píng)估提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：14例尸檢冠狀動(dòng)脈，通過(guò)病史及肉眼觀(guān)察確定5例為正常冠狀動(dòng)脈，9例為粥樣硬化冠狀動(dòng)脈。分離所有病例的冠狀動(dòng)脈即左冠狀動(dòng)脈及右冠狀動(dòng)脈并進(jìn)行取材。通過(guò)HE染色光鏡觀(guān)察將標(biāo)本分為不穩(wěn)定斑塊組(1

3、6個(gè))、穩(wěn)定斑塊組(21個(gè))、粥樣硬化冠狀動(dòng)脈非斑塊區(qū)域組(6個(gè))、正常冠狀動(dòng)脈組(5個(gè))。粥樣硬化冠狀動(dòng)脈非斑塊區(qū)域組及正常冠狀動(dòng)脈組為對(duì)照組。分別將這四組標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)，并通過(guò)檢測(cè)巨噬細(xì)胞(CD-68)、平滑肌細(xì)胞(α-actin)進(jìn)行定位。結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，采用秩和檢驗(yàn)、卡方檢驗(yàn)、Spearman檢驗(yàn)。 結(jié)果：(1) RT-PCR結(jié)果顯示IL-18、MMP-9在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中有mRN

4、A的表達(dá)，在對(duì)照組中無(wú)表達(dá)。不穩(wěn)定斑塊與穩(wěn)定斑塊表達(dá)有差異(p<'IL-18>=0.028，p<'MMP-9>=0.036)，不穩(wěn)定斑塊中IL-18和MMP-9mRNA表達(dá)高于穩(wěn)定斑塊。Spearman非參數(shù)等級(jí)相關(guān)性統(tǒng)計(jì)分析顯示：兩者在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊表達(dá)強(qiáng)度呈正相關(guān)關(guān)系(r<'s>=0.375， P=0.022)。 (2)免疫組織化學(xué)表達(dá)結(jié)果：IL-18主要在粥樣硬化冠脈內(nèi)膜區(qū)域表達(dá)，在對(duì)照組中無(wú)表達(dá)。表達(dá)的部位為巨噬細(xì)胞、泡沫

5、細(xì)胞、纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、內(nèi)膜平滑肌細(xì)胞，主要定位在巨噬細(xì)胞和泡沫細(xì)胞，在中膜平滑肌基本不表達(dá)。不穩(wěn)定斑塊與穩(wěn)定斑塊表達(dá)有差異(P=0.028)，不穩(wěn)定斑塊中IL-18表達(dá)高于穩(wěn)定斑塊。MMP-9在冠脈粥樣硬化斑塊中有表達(dá)，在對(duì)照組中無(wú)表達(dá)。表達(dá)的部位為內(nèi)膜巨噬細(xì)胞、泡沫細(xì)胞、纖維細(xì)胞胞核及核周、內(nèi)皮細(xì)胞胞核及核周、平滑肌細(xì)胞，中膜平滑肌細(xì)胞和纖維細(xì)胞。不穩(wěn)定斑塊與穩(wěn)定斑塊的內(nèi)膜和中膜的表達(dá)均有差異(P<'內(nèi)膜>=0.012，P<'中膜

6、>=0.033)，不穩(wěn)定斑塊中MMP-9表達(dá)高于穩(wěn)定斑塊。Spearman非參數(shù)等級(jí)相關(guān)性統(tǒng)計(jì)分析顯示：兩者在粥樣硬化冠狀動(dòng)脈內(nèi)膜區(qū)域的表達(dá)強(qiáng)度呈正相關(guān)關(guān)系(r<'s>=0.401，P=0.014)。 (3)IL-18和MMP-9的mRNA和蛋白表達(dá)的水平基本一致。 結(jié)論：(1)在正常冠狀動(dòng)脈中無(wú)IL-18和MMP-9的表達(dá)，在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中有IL-18和MMP-9的表達(dá)，并且不穩(wěn)定斑塊的表達(dá)高于穩(wěn)定斑塊。提示