分子標(biāo)記在三疣梭子蟹增殖放流中的應(yīng)用研究.pdf

1、三疣梭子蟹( Portunus trituberculatus)隸屬于十足目( Decapoda)、梭子蟹科( Portunidae)、梭子蟹屬( Portunus)，廣泛分布于我國沿海以及日本、朝鮮、馬來西亞群島等水域。近年來我國沿海三疣梭子蟹自然資源明顯下降,為恢復(fù)現(xiàn)有資源，遼寧省從2012開始，連續(xù)實施了4年大規(guī)模人工放流工作。隨著大量的放流三疣梭子蟹群體進入自然海域，其對野生資源的遺傳多樣性影響也是未知的。
　　本研究采用

2、657bp的線粒體控制區(qū)序列作為分子標(biāo)記，對遼東灣四個野生群體(CXD,YK,JZ和SZ)和兩個放流親蟹群體(XRD和PJ)的遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)進行了分析。結(jié)果顯示四個野生群體中129個個體共定義了96個單倍型，放流親蟹群體中67個個體檢測出50個單倍型，兩個群體之間沒有共享單倍型。野生群體的單倍型多樣度和核苷酸多樣度（0.9657～0.9905，0.016032～0.022864）與放流親蟹群體的單倍型多樣度和核苷酸多樣度（0.96

3、35～0.9828，0.019644～0.19930）大體一致，表現(xiàn)出高水平的遺傳多樣性。AMOVA分析和Fst分析結(jié)果均顯示野生群體與放流親蟹群體之間存在一定的遺傳分化，NJ系統(tǒng)樹中未形成與各群體相對應(yīng)的譜系分支（PJ群體除外）。群體歷史動態(tài)分析表明遼東灣的三疣梭子蟹歷史上曾經(jīng)歷過群體擴張事件。總體來說，本實驗研究的兩個增殖放流親蟹群體與遼東灣四個野生群體均具有豐富的遺傳多樣性，放流親蟹群體的遺傳結(jié)構(gòu)與放流海域的野生群體間發(fā)生了一定程

4、度的遺傳分化但影響不大，種質(zhì)資源質(zhì)量較好。在目前的增殖放流中，為檢測放流用三疣梭子蟹親本和子代的遺傳差異以及親本之間的繁殖貢獻率水平，我們利用10對擁有豐富遺傳多態(tài)性的微衛(wèi)星標(biāo)記，分別對9只放流三疣梭子蟹雌性親本及179只放流子代進行了遺傳學(xué)比較及親子鑒定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，子代的平均觀測雜合度（Ho-avg）、平均期望雜合度（He-avg）和平均多態(tài)性信息含量（PIC-avg）數(shù)值均低于親本，親本和放流子代之間在觀測雜合度（Ho）、多態(tài)性信息

5、含量（PIC）參數(shù)方面并無顯著差異（P>0.05，Wilcoxon signed-rank test）,但期望雜合度（He）遺傳參數(shù)存在顯著差異（P<0.05，Wilcoxon signed-rank test)，子代的遺傳多樣性較親本呈下降的趨勢。使用4個微衛(wèi)星標(biāo)記時，累積排除率≥0.998，親子鑒定的準(zhǔn)確率為56.98％；微衛(wèi)星標(biāo)記為6個時，累積排除率≥0.9999、準(zhǔn)確率達到97.21%；當(dāng)使用8個微衛(wèi)星標(biāo)記鑒定時，準(zhǔn)確率達100