米諾環(huán)素抑制急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究.pdf

1、分類號UDC博士學(xué)位論文密級米諾環(huán)素抑制急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究Thestudyofthemechanismofminocyclineinhibitingapoptosisofratretinalastrogliaafteracuteocularhypertension作者姓名：楊曉春學(xué)科專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)(眼科學(xué))學(xué)院(系、所)：湘雅二醫(yī)院指導(dǎo)教師：段宣初教授論文答辯曰期答辯委員會(huì)主席一中南大學(xué)二O一二年十月博士學(xué)位

2、論文中文摘要中文摘要目的：探索急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡機(jī)制，并探討米諾環(huán)素是否可以減少急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡及其可能的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。方法：1160只健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為四組：假手術(shù)組、模型組、米諾環(huán)素治療組和PBS治療組，每組40只。通過前房加壓灌注平衡鹽溶液(balancedsaltsolution，BSS)建立SD大鼠急性高眼壓模型。假手術(shù)組僅前房灌注BSS而不加壓。米諾環(huán)素治療組大鼠建模后立即

3、給予米諾環(huán)素腹腔注射并連續(xù)給藥3天，PBS治療組則以PBS代替米諾環(huán)素。2術(shù)后第1、3、5、7天分批處死大鼠取雙眼眼球行相應(yīng)指標(biāo)檢測。免疫組織化學(xué)熒光染色分別檢測視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)營養(yǎng)因子前體蛋白(pronervegrowthfactor，proNGF)的表達(dá)和星形膠質(zhì)細(xì)胞p75神經(jīng)營養(yǎng)因子受體(p75neurotrophinreceptor，p75N1R)的表達(dá)，caspase3檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞的凋亡，Westernblot檢測視網(wǎng)

4、膜proNGF、神經(jīng)營養(yǎng)因子(nervegrowthfactor，NGF、)和p75N1R蛋白的表達(dá)，RTPCR檢測proNGF和p75N1R基因的表達(dá)。結(jié)果：1急性高眼壓后大鼠視網(wǎng)膜proNGF和NGF蛋白、NGFmRNA的表達(dá)均明顯增加。ProNGF蛋白的增加量較NGF蛋白更顯著。ProNGF蛋白和NGFmRNA在急性高眼壓后第1天即有明顯表達(dá)，第3天時(shí)達(dá)到高峰，第5天開始降低，第7天進(jìn)一步降低。2急性高眼壓后，視網(wǎng)膜p75N1R蛋

5、白和mRNA的表達(dá)在第1天開始增加，第3天為最高，第5天后開始逐漸降低。3急性高眼壓后第3天，視網(wǎng)膜外叢狀層上CDllB和proNGF雙標(biāo)陽性細(xì)胞，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層(ganglioncelllayer，GCL)上GFAP和p75N1R雙標(biāo)陽性細(xì)胞數(shù)量明顯增加。4急性高壓后視網(wǎng)膜GCL層GFAP及caspase3雙標(biāo)陽性細(xì)胞表達(dá)明顯。5米諾環(huán)素治療后，急性高眼壓第3天，視網(wǎng)膜proNGF、p75NrR蛋白，NGF、p75N1RmRNA表達(dá)明顯