豬胸膜肺炎放線桿菌致病性及免疫原性與TfbA基因的遺傳變異研究.pdf

1、將豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌(ActinobacilluspleuropneumoniaeAPP)血清1、5、7三型菌的參考菌株大量培養(yǎng)后回收菌體，經(jīng)甲醛滅活后加入福氏完全佐劑制成疫苗，分別免疫健康的家兔，獲得了針對APP菌單—血清型的抗血清。凝集效價達(dá)6～8log2。用此三型血清對2004年從山東省各地分離到的13株APP進(jìn)行了血清型鑒定，結(jié)果分別為1型(1株)、5型(3株)和7型(3株)。 用App血清1、5、7三型菌對小鼠進(jìn)

2、行了致病性及免疫原性試驗(yàn)。三型菌對小白鼠的半數(shù)致死量(LD50)分別為1.46×105.5CFU、3.2×106CFU和3.4×106.23CFU。首次免疫小鼠兩周后用試管凝集反應(yīng)測得血清凝集價均為5log2，二免兩周后試管凝集價分別達(dá)到6log2、8log2、7log2。首免兩周后以100LD50菌液攻擊相應(yīng)血清型的小鼠可分別保護(hù)3/4、4/4、3/4，二免兩周后攻擊相同劑量菌液，攻毒保護(hù)分別為3/4、4/4、4/4。 利用P

3、CR方法對App生物Ⅰ型ZY(App-1)株TfbA基因進(jìn)行擴(kuò)增、克隆和序列測定。結(jié)果表明：ZY株TfbA基因全長1782bp，編碼594個氨基酸殘基組成的多肽；將AppZY株與AP37(App-1)株、AP213(App-5)株和AP205(App-7)株的TfbA基因進(jìn)行分析比較，結(jié)果表明ZY株與此三型菌TfbA基因的核苷酸的同源性分別為99.8％、74.4％和72.2％；氨基酸的同源性分別為99.7％、64.1％和58.6％。系統(tǒng)